上海金畔paratechs 60010说明书

mNSET Device for Mice 60010 Instructions for Non-Surgical Embryo Transfer

产品信息
目录#60010
EtO（环氧乙烷）灭菌处理
每盒10个器械（器械单独包装，每个密封袋中有1个小窥器和1个大窥器。）
信息：非手术胚胎移植方法和设备，美国9615903。[PDF]
预期用途
该装置用于将小鼠胚胎经宫颈伦理转移到受体雌性小鼠体内。仅用于研究目的。不用于人类或动物的诊断或治疗用途。
其他用途：mNSET 60010装置也可用于人工授精（AI）或其他材料/病原体转移到受体雌性小鼠体内。对于更大容量的传输，请考虑容量为20-40µl的mC&I设备（60020）。
处理
设备仅限一次性使用。使用后丢弃。
mNSET胚胎移植前
为了生产用于移植的小鼠胚胎和作为受体的假怀孕雌性，使用标准转基因方法。¹按照标准转基因程序，与雄性和雌性小鼠进行交配。如果需要，女性供体可以进行超排卵。胚胎在EmbrysMax®KSOM培养基（Millipore#MR-106-D）或所需培养基中孵育。胚胎应在交配后3.5天（3.5dpc）进行mNSET移植；受体雌性小鼠在mNSET转移当天应为2.5dpc。
mNSET演示视频
快速程序和完整程序演示视频可在此处查看和下载。快速程序视频演示了使用mNSET如何轻松完成小鼠子宫胚胎移植™ （非手术胚胎和精子移植）小鼠装置60010。整个过程视频详细介绍了整个设置和准备过程，直到实际过程结束。
胚胎移植程序
1.将15μl培养基滴到60mm组织培养皿（Falcon 353002或类似物）的盖子上。
2.使用标准胚胎处理移液管将12–20个囊胚加载到培养基中。（注意：移植胚胎的最佳数量将根据小鼠品种和胚胎接受的操作而变化。）
3.将mNSET装置放置在已设置为1.8μl的P-2移液管上（推荐的移液管为Rainin Classic PR2移液管，0.1-2μl或Gilson移液管P2，0.2-2μl）
4.将移液管柱塞按到第一个停止位置，将mNSET装置的尖d降低到培养基中，然后将胚胎缓慢拉入尖d。从介质上取下mNSET装置尖d。
5.小心地将移液管设置为2.0μl，以在mNSET尖d产生一个小气泡，以确保胚胎在插入小鼠期间留在装置尖d内。轻轻地将移液管放置在一边（靠近笼子），以便在步骤9中使用。避免碰撞mNSET尖d。
6.将未麻醉的受体雌鼠放在带有金属丝架的笼子顶部，让鼠标“抓住”笼子杆表面。用拇指和食指抓住尾巴底部，将尾巴向上倾斜，同时用手的另一边轻轻按压尾巴底部。

小鼠用mNSET设备60010有用提示
以下是我们的科学家、技术人员和客户提供的提示和建议，这些提示和建议被证明是有用的。
1.在开始mNSET试验之前，请仔细阅读所有“有用提示”和mNSET for Mouse 60010说明书。指令插入可以在NSET的每个框中找到。
2.在实际实验之前，在没有胚胎的2.5 dpc假怀孕小鼠上练习mNSET技术。
3.mNSET设计为紧贴Rainin Classic PR2，0.1-2µl或Gilson Pipetman P2，0.2-2µl移液管，用于装载胚胎并精确测量设备尖d的培养基。
4.我们建议使用有意识、冷静和未交配的小鼠。这使得小鼠更容易在自然位置找到并进入子宫颈。我们网站上视频中的雌性老鼠没有服用镇静剂。
5.我们使用CD1小鼠，强烈建议将该菌株用于假妊娠受体。我们建议使用体重≥26g且至少60天大的小鼠。
6.胚胎应孵育至囊胚期（e3.5），因为该设备将它们转移到子宫角之一而不是输卵管。一些最终用户已成功使用桑椹胚。
7.选择一种你使用过的培养基，它能让你在孵化胚胎时获得*佳成功。例如，使用M2或KSOM培养基，移植12至20个胚胎。
8.mNSET装置仅能在发情的某些阶段以及在假怀孕小鼠中以2.5dpc通过子宫颈。因此，我们强烈建议使用2.5 dpc假怀孕小鼠（塞子脱落后）进行训练和使用mNSET装置进行胚胎移植。
9.我们发现，将老鼠放在笼子顶部，用铁丝架让它抓住笼子杆表面，这样可以相对容易地让雌性动物保持静止，减少蠕动。使用mNSET说明第6条中所述的保持技术，
10.我们不建议使用润滑剂。您可以使用无菌水或培养基湿润窥器，然后在插入阴道之前去除多余的水分。
11.将小窥器轻轻插入阴道。老鼠天生会把窥器推出一点。轻轻地将其压回原位，使mNSET装置可以穿过子宫颈并进入子宫角之一。
12.可选：取下小窥器，更换为大窥器。如果需要，使用适当的光源，如鹅颈灯，并观察宫颈。
13.使用NSET尖d发现和穿透宫颈时，要耐心，不要施加太大压力。这可能会导致组织损伤，并可能使mNSET装置尖d弯曲，使其几乎无法使用。如果第一次尝试插入mNSET的位置不正确，请轻轻重新定位设备并重复。
14.如果在发现颈部开口时施加过大压力，导致尖d弯曲，则可能发生胚胎丢失。同样，温和的反复尝试与mNSET的成功有关。
15.当mNSET装置的毂接触窥器末端时，您将知道该装置通过宫颈正确插入子宫。
16.要排出胚胎，请将移液管柱塞按到第一个停止位置。数到3。不要松开柱塞。
17.在不释放移液管柱塞的情况下缓慢移除mNSET。如果在取出之前释放柱塞，一些胚胎可能会被拉回尖d。
18.使用后在显微镜下检查mNSET尖d是良好的做法。清晰的尖dmNSE显示尖d内部的可视化效果。
该设备仅设计用于一次性使用。重复使用会用宫颈组织堵塞mNSET尖d。重复使用可能会使导管变得柔韧，不再坚硬，无法通过宫颈。因此，可能会将胚胎植入阴道，而不是预期的子宫角。