advancedbiomatrix胶原酶简介
胶原酶
粉末
目录 #5030
该胶原酶产品以 50 mg 包装大小的冻干无菌粉末形式提供。它已经过专门测试并显示可有效水解胶原蛋白和解离组织。
产品描述
胶原酶由多种酶组成,包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶,旨在有效水解胶原蛋白和解离组织。已经评估了各种胶原酶产品专门用于 Advanced BioMatrix 的胶原蛋白产品。该产品用于提高消化胶原凝胶中分离细胞的活力和功能。
胶原酶以 50 mg 包装大小的冻干无菌粉末形式提供。重构后,产品即可使用。
参数、测试和方法 | 胶原酶 #5030 |
形式 | 冻干粉 |
包装尺寸 | 50 毫克 |
贮存温度 | 2-10°C |
灭菌方法 | 过滤 |
生物负载 (cfu) | < 1 |
资源 | 溶组织梭菌 |
保质期 | 自收到之日起至少 6 个月 |
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使用这些建议作为指导来确定适合您的培养系统的最佳凝胶解离程序。
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在磷酸盐缓冲盐水或其他 pH 中性介质中重构冻干胶原酶粉末(50 毫克)。可以使用 1 mg/ml 的典型浓度。
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从胶原凝胶中吸出培养基。
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用预热的 PBS 或其他 pH 中性培养基清洗胶原凝胶 2X,以去除可能抑制胶原降解的培养基。
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加入适量的胶原酶溶液(一个凝胶体积就足够了)。例如:对于含有 0.5 ml 凝胶的 24 孔板,添加 0.5 ml 胶原酶溶液。
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转移到 37ºC 培养箱中 30-60 分钟。为了促进胶原凝胶的更快解离,凝胶和胶原酶溶液可以使用大口径移液器吸头上下移液。
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如有必要,在 37°C 下再孵育 30-60 分钟,以完成凝胶的消化。如果需要,每 15 分钟移取一次凝胶/细胞混合物。注意:较厚的凝胶或含有较高浓度细胞的凝胶可能需要更多时间。
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凝胶*消化后,向凝胶/细胞混合物中加入等体积的*培养基,然后收集细胞。
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冲洗收集任何残留细胞的培养容器。
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在室温下以 250 xg 离心细胞悬液 5 分钟。
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小心吸出上清液,将细胞沉淀重悬于 0.5 -1 ml 新鲜培养基中。
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使用血细胞计数器和台盼蓝确定细胞计数和活力。