abbexa abx251458说明书

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人催乳素诱导蛋白（PIP）ELISA试剂盒

货号： abx251458

 

人催乳素诱导蛋白ELISA试剂盒是针对人催乳素诱导蛋白（PIP）的ELISA试剂盒。 
 

目标 催乳素诱导蛋白
反应性 人的
经过测试的应用 ELISA法
建议稀释 宜稀释度/浓度应由终用户确定。
存储 装运温度为4°C。收到后，按照试剂盒手册中的存放说明存放试剂盒。
有效期 该套件的有效期为6个月。
稳定性 试剂盒的稳定性取决于活性丧失的速率。在适当的存储条件下，有效期内的丢失率小于5％。为了大程度地降低性能波动，应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个测试始终由同一用户执行。
UniProt主AC P12273（UniProt， ExPASy）
UniProt次级AC A0A963，A0A9C3，A0A9F3，A4D2I1
UniProt条目名称 PIP_HUMAN
基因符号 画中画
凯格 hsa：5304
串 9606.ENSP00000291009
测试范围 31.2 pg / ml-2000 pg / ml
标准格式 冻干
ELISA检测 比色法
ELISA类型 三明治
ELISA数据 定量的
样品类型 血清，血浆和其他生物液体。
测定原理 该试剂盒基于三明治酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到96孔板上。将标准品，测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂，并孵育整个平板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后，只有包含足够PIP的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上的PIP量成正比。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量光密度（OD），由此可计算出PIP的浓度。
套件组件
  • 预涂96孔微孔板
  • 标准
  • 标准稀释液
  • 洗涤缓冲液
  • 检测试剂A
  • 检测试剂B
  • 稀释剂A
  • 稀释剂B
  • TMB基板
  • 停止解决方案
  • 封口机
必需但未提供的材料
  • 37°C恒温箱
  • 多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头
  • 喷瓶或自动微孔板清洗机
  • 1.5毫升管
  • 蒸馏水
  • 吸收性滤纸
  • 100毫升和1升量筒
  • 酶标仪（波长：450 nm）
  • ELISA摇床
样品收集/准备
  • 血清：应将样品收集到血清分离管中。在4°C或室温下放置长达60分钟，使管子在垂直位置静置过夜，以凝结血清。以约1000×g的速度离心20分钟。立即分析血清或等分试样并储存在-20°C或-80°C下。
  • 血浆：使用肝素或EDTA作为抗凝剂收集血浆。收集30分钟内以1000×g离心15分钟。立即测定或分装并保存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高胆固醇样品。
  • 组织匀浆：组织匀浆的制备取决于组织类型-这仅是示例。用冰冷的PBS冲洗组织以去除多余的血液。均质前称重。切碎组织，用组织匀浆器在PBS中的冰上匀浆并超声处理细胞悬液。将匀浆以5000×g离心5分钟，收集上清液。立即测定或等分试样并在-20°C储存。
试剂准备
  • 1）标准液：用推荐体积的标准稀释液配制标准液，制成标准溶液。然后按照协议中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行系列稀释。
  • 2）洗涤缓冲液：按照协议中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。
  • 3）检测试剂制备：计算所需工作溶液的总体积。用稀释剂A和稀释剂B分别以1：100稀释检测试剂A和检测试剂B。
测定步骤
  • 1）设置标准品，测试样品和对照孔。
  • 2）将100μl稀释的标准液分装到标准孔中。
  • 3）将100μl标准稀释缓冲液等分到对照（零）孔中。
  • 4）将100μl稀释的样品等分到样品孔中。在37°C下孵育1小时。
  • 5）将100μl检测试剂A分装到每个孔中。在37°C下孵育1小时。
  • 6）洗3次。
  • 7）将100μl检测试剂B分装到每个孔中。在37°C下孵育30分钟。
  • 8）洗5次。
  • 9）将90μlTMB底物等分到每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。
  • 10）等分50μl终止溶液。
  • 11）在450 nm下测量OD。
协议
  • 使用前，将试剂盒的组分和样品平衡至室温（18-25°C）。建议为每个测试绘制标准曲线。
  • 1.分别在预涂板上设置标准，测试样品和对照（零）孔，然后记录其位置。建议测量每个标准品和样品至少一式两份。
  • 2.将100 µL的每种标准品，对照和样品加到适当的孔中。用盖密封板并在37°C孵育1小时。
  • 3.取下盖子并丢弃液体。
  • 4.向每个孔中添加100μl检测试剂A工作溶液。用盖密封板并在37°C孵育1小时。
  • 5.取下盖子并丢弃溶液。用1X Wash Buffer洗涤板3次。
  • 6.将100 µL检测试剂B工作溶液添加到每个孔中，密封并在37°C孵育30分钟。
  • 7.弃去溶液并按照上一步中的说明用洗涤缓冲液洗涤板5次。
  • 8.将90μlTMB底物等分到每个孔中。用盖密封板并在37°C下孵育10-20分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，宜时间应由用户确定。请勿超过30分钟。
  • 9.向每个孔中添加50 µL终止溶液。立即在450 nm处读取。
结果计算 为了进行计算，请对每个参考标准品和每个样品的OD450重复读数取平均值，然后减去平均对照（零）OD450读数。可以将标准曲线绘制为每种参考标准溶液（Y）的相对OD450与每种标准溶液（X）的各自浓度的关系。可以从标准曲线内插样品的PIP浓度。
可用性 在5-12个工作日内发货。
注意 本产品仅供研究使用。

 

范围和灵敏度可能会发生变化。
请注意，我们的ELISA和CLIA试剂盒针对检测天然样品（而非重组蛋白）进行了优化。我们无法保证检测到重组蛋白，因为它们与天然蛋白可能具有不同的序列或三级结构。