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interchim FT-664790说明书

pNPP溶液（ELISA用AP底物）

描述

Uptima pNPP底物是用于检测碱性磷酸酶(AP)的显色底物，产生黄色可溶性副产物。经典用于ELISA技术。该处方针对较长的有效期和良好的批间重现性进行了优化。在含有高纯度和稳定剂的对硝基苯基磷酸盐(pNPP)混合物的*小瓶中对其进行调节。与碱性磷酸酶结合物反应后，产生深黄色，可在405 nm处读取。Uptima提供了需要准确和灵敏结果的优化处方。该底物不适用于免疫化学或蛋白免疫印迹法（要求Uptima提供合适的替代底物）。

产品编号： UP664790，200 mL UP664791，500 mL UP664792，1 L

灵敏度 Uptima pNPP底物非常敏感，产生的背景非常低。

在大多数应用中，Uptima pNPP通常优于其他可用的AP底物，并且通常与过氧化物酶相似的显色检测系统。

稳定性底物在 + 4 ℃下可稳定储存30个月以上。

储存条件 + 4 ℃下避光储存。(L)

pNPP底物对某些储存和使用条件敏感：

1. 避免直接光暴露或接触污染物质。

2. 请勿直接从瓶中移取：首先将所需溶液装入洁净容器中

3. 请勿将瓶子打开过长

4. 采用冷冻凝胶包运输。请勿冷冻。

建议方案

Uptima pNPP为即用型。只需让所需量达到室温即可。

1. 可根据您的标准方案进行ELISA试验。*清洗微孔板，以除去未结合的碱性磷酸酶标记探针（抗体、凝集素、核苷酸……）。冲洗不充分可能导致背景不理想。Uptima建议在PBST（NaCl 150 mM、磷酸盐20 mM、Tween20®0.1%，pH 7.5）中清洗4次。

2. 向各微孔板小孔中加入150µl pNPP底物。缓慢搅拌以混匀。在 + 37 ℃下避光孵育30分钟。立即显色。

注：Uptima pNPP溶液为即用型。请勿稀释。

可根据检测系统调整每孔体积和孵育持续时间。

如果染色过快或过强，应稀释一抗或二抗，或将染色时间缩短至15 min。不建议稀释pNPP底物

3. 在405 nm处直接读取吸光度，或在停止步骤（第4点）后读取，以获得更准确的结果。请勿比较停止和未停止时获得的值。

4. 反应终止（可选）：在每个孔中加入100µl终止液(1 MNaOH)。颜色保持黄色，但不波动，允许在2小时或更长时间内在405 nm处读数。