自噬研究用抗体

◆兔抗大鼠 LC3

　　LC3 是芽殖酵母自噬相关蛋白 Atg8 的哺乳类类似物。LC3 在细胞质上合成后，切除Ｃ末端形成 LC3-I。LC3-I 与 E1 样泛素连接酶 Atg7、E2 样泛素连接酶 Atg3 携带的磷脂结合形成 LC3-II。LC3-II 结合形成自噬膜型。因此，LC3 被用做自噬的标志物之一。本产品可同时识别 LC3-I、LC3-II。

●　形状：抗血清。不含防腐剂、稳定剂

●　抗原：合成肽，与大鼠LC3B的氨基酸序列 5-18 相当

●　特异性：与人、大鼠、小鼠 LC3B 反应

　　实际稀释倍率：免疫细胞化学 1：200~500（共聚焦显微镜）

　　Western blotting 1：500~5,000

●　推荐稀释缓冲液：1％ BSA in 20 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 0.15 mol/L NaCl，0.1％ NaN₃

　　※　背景较高情况下，请使用加了 0.1% Tween20 的稀释缓冲液。

 

小鼠 MEF 提取液 Western blotting

用 SDS-PAGE 分离 MEF（小鼠胎儿成纤维细胞）提取液，转至 PVDF 膜后，将本品作为第一抗体， 进行 Western blotting。 Atg7+・・・野生型，Atg7－・・・Atg7 缺失型 一抗：本品（1：5,000）、室温、反应１小时 二抗：HRP 标记 山羊抗兔 IgG（1：20,000），室温、反应１小时 （数据提供：顺天堂大学医学部生化学　第一讲座　上野隆）

HeLa 细胞的荧光染色

样品：经多聚甲醛固定和毛地黄皂苷处理的 HeLa 细胞 封闭液：１％ BSA和含１％正常羊血清的 20 mmol/LTris-HCl（pH7.5)，0.15 mol/L NaCl，0.1％ NaN3、30℃、反应１小时 一抗：本品（1：500）、30℃、反应１小时 二抗：Cy3 标记羊抗兔 IgG（1：2,000）、30℃、反应１小时 （数据提供：顺天堂大学大学院医学研究科研基地ー吉川美加）

产品编号	产品名称	规格	容量
010-22841	Anti Rat LC3, Rabbit	免疫组化用	50 μL

 

◆兔抗 SQSTM1/A170/p62

　　SQSTM1/A170/p62 是泛素结合蛋白，氧化应激反应依赖性表达。SQSTM1/A170/p62 的异常化，会导致骨代谢异常、肥胖、２型糖尿病等。近来有报道称 SQSTM1/A170/p62 可与自噬相关因子 LC3 结合，因此在诱导泛素/蛋白酶体系到自噬系的蛋白质分解方面备受关注。

●　形状：大肠杆菌蛋白质吸收后，２倍稀释的抗血清。防腐剂含 0.1% 的 NaN₃。

●　抗原：小鼠 SQSTM1（A170）的氨基酸序列 254-333 重组体（N末端含 T7tag，Ｃ末端含 His tag）

●　特异性：与大小鼠 SQSTM1（A170/ZIP）反应；与人 SQSTM1（A170/ZIP）反应极弱。

●　实际稀释倍率：Western blotting  1：200；

　　免疫组织染色  1：1,000

　　免疫荧光染色  1：1,000

 

小鼠 MEF 提取液的 Western blotting

固定：４%多聚甲醛 包埋：石蜡包埋　 染色：亲和素-生物素- 过氧化物酶素法 一抗：本品　1：1,000 二抗：生物素标记抗兔 IgG　 （数据提供：鸟取大学 中曾一裕）

产品编号	产品名称	规格	容量
018-22141	Anti SQSTM1/A170/p62, Rabbit SQSTM1/A170/p62抗体	免疫组化用	100 μL

◆兔抗人Atg7

　　Atg7 是自噬反应中形成自噬体所必须的基因之一。能与泛素样蛋白质 Atg8 和 Atg12 结合的 E1 样泛素连接酶。

●　形状：抗血清。不含防腐剂和稳定剂

●　抗原：与人 Atg7 的氨基酸序列 556-571 相当的合成肽

●　特异性：与人、大鼠、小鼠的 Atg7 反应

●　实际稀释倍率：Western blotting  1：1,000~5,000

●　推荐稀释缓冲液：1％ BSA in 20mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 0.15mol/L NaCl, 0.1％ NaN₃
　　※　背景较高的情况下，请使用加入 0.1% Tween20 的稀释缓冲液。

用 SDS-PAGE 分离 MEF（小鼠胎儿成纤维细胞）的提取液，转至 PVDF 膜后，以本品为第一抗体， 进行 Western blotting。 Atg7+, Atg3+ ･･･野生型、Atg7－ ･･･Atg7 缺失型、 Atg3－ ･･･Atg3 缺失型 一抗：本品（1：1,000）、室温、反应１小时 二抗：HRP 标记山羊抗兔 IgG（1：20,000）、室温、反应１小时 （数据提供：顺天堂大学医学部生化学第一讲座 上野隆）

产品编号	产品名称	规格	容量
013-22831	Anti Human Atg7, Rabbit	免疫组化用	50 μL

 

◆相关产品

自噬活性化因子

产品编号	生产商编号	产品名称	规格/制造商	容量
185-01721	–	Resveratrol 白藜芦醇	生化学用	100 mg
181-01723	–			500 mg

 

自噬抑制剂

产品编号	生产商编号	产品名称	规格/制造商	容量
038-17971	－	Chloroquine diphosphate 磷酸氯喹	生化学用	5 g
036-17972				25 g
054-08021	－	E 64d	细胞生物学用	1 mg
050-08023				5 mg
129-04861	－	LY-294002	生化学用	5 g
125-04863				10 g
123-04864				25 g
230-02341	－	(+)-Wortmannin 渥曼青霉素	细胞生物学用	2 mg
236-02343				10 mg

参考文献

1). Ishii, T., et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 226, 456(1996).

2). Ishii, T., et al.: J. Biol. Chem., 275, 16023(2000).

3). Komatsu, M., et al.: Cell, 131, 1149(2007).

4). Nakaso, K., et al.: Brain Res. Mol. Brain Res., 69, 155(1999).

5). Jiang,P.,et al.: Methods,75,13(2015).