可用于iPS细胞的冷冻保存！

培养细胞冻存液COS banker系列

　　COS banker是不含血清和牛来源化合物的安全培养细胞冻存液。

　　COS banker II是为了保存过继免疫淋巴细胞而开发的淋巴细胞冻存液。

 

◆特点

●　可以冷冻保存iPS细胞。

●　无需稀释使用。

●　复苏后的细胞存活率优异。

●　"COS banker"不含动物的血清以及其他动物源成分。^＊1

●　为了防止其中的DMSO腐蚀PET容器，特意采用玻璃装瓶。

*1  "COS banker II"含有GMP级人血清白蛋白的稳定剂。

 

◆实验步骤

1.    以转速1200 rpm/5 min对处于对数期^*2的细胞进行离心操作，然后收集大约5×10⁵~1×10⁷个离心后的细胞。

2.    向细胞沉淀中添加1mL本产品，进行重悬后放进冻存管中，在-80°C冷冻保存。

3.    用液氮储存时，细胞请预先在-80°C下冷冻1天以上。

4.    复苏操作请在37°C的恒温水浴锅中快速进行。

*2 冻存的细胞需位于对数期，这点对于提高复苏后的存活率至关重要。

 

◆规格

产品名称	COS banker	COS banker II
产品编号	COS-CFM01	COS-CFM02
产品包装	120mL	120mL
成分	含DMSO（含量不公开）  不含血清	含DMSO（含量不公开） 含人血清白蛋白 不含血清
储存方法	低温避光保存（2~8°C）	低温避光保存（2~8°C）
有效期	生产后2年	生产后2年

◆质量控制

检查项目	测试方法	标准
无菌性	TGC、SCD以及培养法（日本药典）	不生长
内毒素	动力学比色法（日本药典）	0.3 EU/ｍL 以下
细胞保存性	冷冻7天后重新复苏的细胞生存	与对照冻存液相同

◆使用例子

COS banker	iPS细胞（Dotcom）、
	Daudi（人伯基特淋巴瘤）、HeLa S3（人宫颈癌）、
	K562（人慢性骨髓性白血病）、Raji（人伯基特淋巴瘤）、
	MOLT-4（人急性淋巴细胞白血病 : T- 细胞）、
	CTLL-2（小鼠T : IL-2 依赖性）、NIH/3T3（小鼠胎儿）、
	PC-12（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤）、CHO-K1（中国仓鼠卵巢）、
	Vero细胞（非洲绿猴肾来源细胞株）、
	MDCK细胞（犬肾小管上皮细胞来源的细胞株）
	MCF-7（人乳癌） 、HepG2（人肝癌）、
	P3U1（小鼠骨髓瘤）、成纤维细胞、
	表皮角化细胞、血管内皮细胞、杂交瘤、SF9（昆虫细胞）
COS   banker II	人末梢血来源活化淋巴细胞、
	Daudi细胞、Raji细胞、K652细胞、
	Molt-4F细胞、CTLL-2细胞、MCF-7（人乳癌）、
	HepG2（人肝癌）、P3U1（小鼠骨髓瘤）、
	成纤维细胞、表皮角质形成细胞、血管内皮细胞、
	杂交瘤、CHO细胞（中国仓鼠卵巢来源细胞株）、
	MDCK细胞（犬肾小管上皮细胞来源的细胞株）、HeLa（人宫颈癌）、SF9（昆虫细胞）

◆iPS细胞

【冷冻保存程序（缓慢冻结法）】

●　用CTK溶液回收细胞

●　离心（1000 rpm，5分钟），除去上清液

●　添加COS banker，重悬细胞

●　分装到冻存管中

●　将冻存管放入冻存盒中。

●　置于-80℃的超低温冰箱中

●　次日将冻存管移至液氮中

图1 iPS细胞（Dotcom）的冻存结果

左：复苏后第二天、   右：复苏后第六天

 

◆人淋巴细胞

图2 （左图）不同细胞冻存液的细胞存活率比较

添加0.5 mL细胞（活细胞浓度 3×10⁶ cells/mL）至冻存管，并储存在-80°C中。一周/一个月/两个月后复苏（在37°C恒温水槽中孵育90秒，剩余的冷冻细胞摇晃融解），测量存活率。

灰：一周后、 蓝：一个月后、 黑：2个月后

 

图3（右图）复苏后的细胞增殖情况

复苏冻存了一周的淋巴细胞，将各个培养基的活细胞浓度调至20×10⁴ cells/mL，在水浴锅中培养。对第5天及第6天的活细胞进行计数。

◆产品列表

COS banker

不含血清和牛来源化合物的安全培养细胞冻存液。

产品编号	制造商	产品名称	包装
COS-CFM01	KOJ	COS banker [Cell Freezing Medium] (chemical defined) COS banker [细胞冻存液] （化学成分明确）	120 mL

COS banker II

为了保存过继免疫淋巴细胞而开发的淋巴细胞冻存液。

产品编号	制造商	产品名称	包装
COS-CFM02	KOJ	COS banker II [Cell Freezing Medium] COS banker II [细胞冻存液]	120 mL