Agrisera AS11 1739 说明书

世界*实验材料供应商Agrisera正式上海金畔为其中国代理,Agrisera 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Agrisera 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Agrisera公司于1980年在瑞典成立,Agrisera公司一直致力于发展科学研究所需的蛋白抗体研发与销售,产品主要有:多种植物蛋白酶抗体,呼吸作用(线粒体)相关蛋白的多克隆抗体,Arabidopsis thaliana,Chlamydomonas reinhardtii ,以及其它一些较为稀有的蛋白抗体

 

ADGP | ADP-glucose pyrophosphorylase

ADGP | ADP-葡萄糖焦磷酸化酶

AS11 1739 | 克隆性:多克隆 | 主体:兔子 | 反应物种:A.thaliana,C. reinhardtii,H. vulgare,Polytomella sp。,Z. mays

产品信息
背景  

ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)催化了植物中淀粉体中叶绿体和储存淀粉中的瞬时淀粉合成中的*个步骤(Tetlow ,2004)。高等植物中的AGPase由分离的基因编码的两个不同的亚基组成,形成L2 S 2异源四聚体。大亚基(L)是变构活性的调节剂,而小亚基(S)是催化亚单位(Kim ,2007)。共聚物:ADP-葡萄糖焦磷酸化酶,ADP-葡萄糖合成酶,AGP酶B,α-D-葡萄糖-1-磷酸腺苷转移酶

免疫原  

的一部分拟南芥重组ADP葡萄糖焦磷酸化酶小亚基,TAIR:At5g48300,UniProt的:P55228

主办   兔子
克隆   多克隆
纯度   血清
格式   冻干
数量   50μl
重建   对于重建,加入50μl无菌水。
存储  

储存于-20°C冻干/重构; 一旦重构,使等分试样避免反复冻融循环。请记住,在打开它们之前,要简单地旋转管子,以避免冻干物质附着在管子或管子两侧可能发生的任何损失。

测试应用程序   免疫印迹(WB)
相关产品  

涉及碳水化合物代谢的其他抗体

植物和藻类蛋白提取缓冲液

二抗

应用信息
推荐稀释  

1:1000到1:5000取决于ECL灵敏度(WB)

预期| 明显MW  

49.4 | 52

确认反应性   拟南芥,Heterum vulgare,Zea mays
预测反应性  

双子叶植物包括:Beta vulgaris,Solanum lycopersicum,Vitis vinifera,单子叶植物,包括:Oryza sativaTriticum aestivum,藻类:莱茵衣藻,蓝细菌和其他细菌(衣原体,平面菌纲,Proteobacteria,螺旋体和verrucomicrobia)。

没有反应  

目前已知无预测反应性的确认例外

附加信息  

使用2D凝胶电泳已经排除了该抗体对Rubisco的交叉反应性。

所选参考  

在可用时添加,2014年7月发布抗体。

 

应用实例

用蛋白质提取缓冲液PEB(AS08 300)提取10μg来自拟南芥 (1)Hordeum vulgare (2)Zea mays (3)总蛋白的总蛋白。样品用1X样品缓冲液(NuPAGE LDS样品缓冲液(Invitrogen),补充有50mM DTT并在70℃加热5分钟,并在加载前保持在冰上,蛋白质样品在NuPAGE4-12%Tris-双凝胶(Invitrogen)LDS-PAGE,并使用槽转移在PVDF上印迹1小时至1.5小时。在2%封闭试剂(GE RPN 2125; Healthcare)或溶解于20mM Tris的5%非脂肪乳中转移后,在室温搅拌下,将含有0.1%(v / v)吐温-20(TBS-T)的137mM氯化钠pH7.6培养1小时,将印迹以1:5000稀释(封闭试剂)在室温下搅拌1小时,倾出抗体溶液,短暂漂洗2次,然后用TBS-T在室温下搅拌洗涤1×15分钟和3×5分钟,将印迹在二抗(抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联,推荐二抗AS09 602)稀释t 在室温下搅拌1〜25 000封闭试剂1小时。印迹如上所述洗涤。使用TMA-6(Lumigen)检测试剂根据制造商的说明书将印迹显影5分钟。使用CCD成像仪(FluorSMax,Bio-Rad)和Quantity One软件(Bio-Rad)获得印迹图像。

进行2D凝胶电泳以排除该抗体对Rubisco的交叉反应性

将WT-Col-0 拟南芥叶子在液氮中冷冻,将可溶性蛋白质在含有50mM HEPES,5mM NaCl和10mM MgCl 2的缓冲液中提取。通过非还原蓝色天然PAGE(5-12.5%)分离10μg和17μg天然蛋白质复合物,然后通过还原SDS-PAGE(15%用6M尿素)在第二维中进一步分离,并吸印1小时至使用Höefer半干吸墨纸的PVDF膜。在室温(RT)搅拌下,用TTBS中的2%牛奶将斑块封闭3小时。将印迹在+ 4℃下以1:2000稀释过夜孵育一次抗体。倾析抗体溶液,并在室温下用TTBS在搅拌下将印迹洗涤3×5分钟。将印迹在室温下搅拌下,在1%乳/ TTBS中稀释至1:25000的二抗(来自Agrisera AS09602的抗兔IgG 抗性马匹萝卜过氧化物酶)中温育2小时。印迹在TTBS中在TTBS中洗涤3×5分钟,并在室温下用TBS洗涤1×5分钟,并用ECL根据制造商的说明书显影5分钟。曝光时间为30秒。

来自芬兰图尔库大学的Lauri Nikkanen感谢

藻类样品的

蛋白质印迹来自莱茵衣藻菌株CC-124 (1)衣藻衣藻菌株CC43-48(STA6)(2)Polytomella sp。的总蛋白质(40μg)Pringsheim 198.80 (3)在5-12%丙烯酰胺/ 6M尿素SDS-PAGE上分离,并印迹到硝酸纤维素膜上。在搅拌下,在含有5%低脂奶的T-TBS(0.1%Tween in Tris Buffer Saline)中,在室温(RT)下1小时封闭印迹。将印迹在1:2 500的稀释度下在*抗体中在搅拌下在室温下孵育1小时。倾析抗体溶液,并在T-TBS,RT搅拌下将印迹洗涤两次15分钟。将印迹在稀释至1:25000的二次抗体(山羊抗兔IgG,偶联的辣根过氧化物酶,Agrisera,AS09602)中,在室温下搅拌孵育 1小时。如上所述洗涤印迹并使用自制的增强化学发光系统(Durrant,Nature 346:297,1990)进行显影。使用CCD成像仪(ImageQuant LAS4000)获得印迹图像。