Formedium植物媒介促进大肠杆菌培养

Formedium在其培养基中添加了六种植物培养基，用于培养大肠杆菌。在所有六种植物培养基中，对于以下LB Miller培养基，LB Lennox培养基和2YT培养基的配方，胰蛋白胨已被大豆蛋白胨替代。胰蛋白胨和酵母提取物作为生长和蛋白质表达的一般氮源存在。两者都是氮的*来源，另外酵母提取物提供B型维生素，碳水化合物和生长因子。

在植物培养基中，因此避免了用动物来源的成分污染培养基，用大豆蛋白胨代替胰蛋白胨。与作为牛奶酪蛋白的胰腺消化物的胰蛋白胨相反，其替代大豆蛋白胨通过大豆粉的Papaic水解制备。与胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨的氮含量（9.5％）略低，其氨基氮含量（3％）相同。这种差异小于2％，并且不会显着影响生长和蛋白质表达。

使用胰蛋白胨作为氮源和大豆蛋白胨作为替代来源的比较研究显示生长没有差异。

在液体培养基中，通过680nm处的光密度测量大肠杆菌的细胞生长，这在LB Miller Broth，LB Lennox Broth和含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的2YT肉汤培养基中培养的细胞的生长曲线之间未显示任何显着差异。
在LB Lennox Agar的菌落形成单位（CFU）的固体培养基计数中，含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的LB Miller琼脂和2YT琼脂彼此没有显着差异。

含有大豆蛋白胨和胰蛋白胨的培养基之间没有显着差异。与在液体和固体培养基中使用胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨也表现良好。

在所有三种培养基LB Miller Vegetal培养基，LB Lennox Vegetal培养基和包含大豆蛋白胨的2YT植物培养基中，不存在动物来源的成分。由于没有动物源组件Formedium证明;

• 在本产品的制造过程中，不使用源自动物或来自动物的原料。
• 生产中使用的材料符合经指令1999/82 / EC修订的欧洲指令75/318 / EEC。

因此，Formedium Ltd.认为该产品在牛海绵状脑病（BSE）或传染性海绵状脑病（TSE）方面没有任何风险。

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方法：
肉汤培养：在LB Lennox，LB Miller和2YT培养基中测量细胞生长。
每种培养基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制剂中。

• 将单菌落在5ml所有三种培养基中孵育（3胰蛋白胨对3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 在第1天：100稀释后，在150ml烧瓶中培养30ml，温度为37℃，180rpm。通过每小时测量的680nm的光密度测量生长
• 3生物重复
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10. 
  2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5。

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方法：
平板上的琼脂培养：在LB Lennox，LB Miller和2YT琼脂平板上测量菌落形成单位的数量。
每种培养基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制剂中。

• 将单菌落在5ml所有三种培养基中孵育（3胰蛋白胨对3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 第100天，将100μl10倍稀释系列（至10-6）涂布在与琼脂相同的培养基上（例如，Miller肉汤菌落到Miller琼脂上，Lennox-Soya菌落到Lennox-Soya琼脂上）。在37°C下孵育O / N.
• 3个生物重复的菌落计数（cfu / ml）
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5，琼脂15. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10，琼脂
  15。2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5，琼脂15。

VLB-Broth Lennox

将20克粉末介质悬浮在1升蒸馏水中，在室温下干燥。