标签归档：引物

firebirdbio自回避分子识别系统

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firebirdbio自回避分子识别系统（SAMRS 

核酸扩增反应遭受脱靶扩增产物的形成。该问题随着反应中引物的数量而增加，并且主要由于引物-引物相互作用而发生。因此，从引物碱基中选择性除去氢键合单元会导致产生自我逃避的DNA引物，可以添加这些引物以实现和改善多重PCR。

 

如下所示，带*的SAMRS碱基可以与标准碱基（在靶标或扩增子中）成对，但不能与其他SAMRS碱基成对。

            
                                    

 自回避分子识别系统-SAMRS TM
亚磷酰胺和寡核苷酸

 

 

T* phosphoramidite
1g $1050
10g $8220
A* phosphoramidite
1g $655
10g $5340
C* phosphoramidite
1g $394
10g $3150
G* phosphoramidite
1g $110
10g $880

 

 

含有SAMRS的寡核苷酸：

 

将SAMRS碱基放入PCR和其他扩增技术所用引物中的一般规则。大写字母表示标准基数，小写字母表示SAMRS基数。 

 

  • 建议长度为20-35 nts。SAMRS碱基应在寡核苷酸3'末端的前4至5个位置使用，而不是在前面的3'碱基中使用。
  • 每个寡核苷酸应使用两个至四个SAMRS碱基，优选两个或三个SAMRS修饰。
  • SAMRS t碱基在引物二聚体的形成方面没有显示出太多的减少，因此在选择时好用a，g或c代替t。
  • 避免在由三个和四个连续相同的碱基组成的字符串中使用SAMRS碱基。例如：应避免使用ggg，ccc，aaa，ttt，gggg，cccc，aaa和tttt。
  • SAMRS碱基与标准碱基分开，例如：gGg，cCc，aaAA和tTt。
  • 如果寡核苷酸的3'末端为标准A或T，则第二个碱基也应为标准碱基，然后进行两个或三个SAMRS修饰。

 

Firebird还准备SAMRS寡核苷酸文库。

SAMRS可以在寡核苷酸中与AEGIS结合使用，以实现高度复用和高度清洁的PCR和等温扩增。请咨询。

 

与所有引物设计一样，Firebird无法保证遵循这些规则制成的寡核苷酸的性能。

 

Benner等人，2015；Glushakova et al。，2015a，2015b; Hoshika et al。，2010; Sharma等，2014；Yang等人，2015年和未发布的数据

 

 

T* phosphoramidite
1g $1050
10g $8220
A* phosphoramidite
1g $655
10g $5340
C* phosphoramidite
1g $394
10g $3150
G* phosphoramidite
1g $110
10g $880

图解blast验证引物教程

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http://www.genecool.com/?fromuser=%E6%9D%A8%E5%BB%BA%E8%BE%89

 

    图解blast验证引物教程
                  ——以文献报道的人类的ABCG2的引物为例
                    
1、 进入网页：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/
2、 点击Basic BLAST中的nucleotide blast选项
3、 完成2操作后就进入了Basic Local Alignment Search Tool界面
（1）在Enter Query Sequence栏中输入引物序列：
       注：文献报道ABCG2的引物为5’-CTGAGATCCTGAGCCTTTGG-3’;
5’-TGCCCATCACAACATCATCT-3’
简便的做法是同时输入上下游引物。输入上下游引物系列都从5’— 3’。 输入上游引物后，加上≥20个字母n，再输入下游引物，如下图：
（2）在Choose Search Set栏中：
      Database根据预操作基因的种属定了，本引物可选Human genomic + transcript或Others （nr etc.）。本人倾向于选后者，觉得此库信息更多。如下图：
 
（3）在Program Selection中：选择Somewhat similar sequences （blastn）项，如下图：
 
（4）在此界面zui下面：如下图
Show results in a new window项是显示界面的形式，可选可不选，在此我们选上了。关键要点击Algorithm parameters参数设置，进入参数设置界面。
 
4. 参数设置：
   （1）在General Parameters中：Expect thresshold期望阈值须改为1000，大于1000也可以；在Word size的下拉框将数字改为7。如下图：
 
 
（2）Scoring Parameters无须修改
（3）Filters and Masking中，一般来说也没有必要改
 
5．点击zui下面一栏的BLAST按钮，如图：
 
6.点击BLAST按钮后，跳转出现如下界面：
 
7. 等待若干秒之后，自动跳转出现显示BLAST结果的网页。该网页用三种形式来显示blast的结果。
（1）图形格式：
 
 

简并引物设计方法（实际操作步骤）

发表于由

http://www.genecool.com/?fromuid=102401

自己做过一些简并引物，现将我利用生物信息学资源设计简并引物的各个步骤作一个总结，各位战友可将各自的心得体会写下，以便大家交流！！！

一、利用ncbi搜索不同物种中同一目的基因的蛋白或cDNA编码的氨基酸序列
因为密码子的关系，不同的核酸序列可能表达的氨基酸序列是相同的，所以氨基酸序列才是真正保守的。首先利用NCBI的Entrez检索系统，查找到一条相关序列即可。随后利用这一序列使用BLASTp（通过蛋白查蛋白），在整个Nr数据库中中查找与之相似的氨基酸序列。
二、对所找到的序列进行多序列比对
将搜索到的同一基因的不同氨基酸序列进行多序列比对，可选工具有Clustal W，也可在线分析[url][/url]http://www.ebi.ac.uk/clustalw/ 。其结果入下图所示,所有序列的共有部分将会显示出来。“*”表示保守，“：”表示次保守。

三、确定合适的保守区域
设计简并引物至少需要上下游各有一个保守区域，且两个保守区域相距50～ 400个aa为宜，使得pcr产物在150~1200bp之间，zui重要的是每一个保守区域至少有6个aa残基，因为每条引物至少18bp左右。若比对结果保守性不是很强很可能找不到6个aa的保守区域，这时可以根据物种的亲缘关系，选择亲缘相近的物种进行二次比对，若保守性仍达不到要求，则需进行三次比对。总之，究竟要选多少序列来比对，要根据前一次比对的结果反复调整。zui终目的就是有两个6个aa且两者间距离合适的保守区域。
四、利用软件设计引物
当得到保守区域后，就可以利用专业的软件来设计引物了，其中pp5支持简并引物的设计（关于其的使用请见笔者的另一个帖子http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=8798113&sty=1），将参与多序列比对的序列中的任一条导入pp5中，再将其翻译成核苷酸序列，有密码子简并性，其结果是有n多条彼此只相差以个核苷酸的序列群，该群可用一条有简并性的核苷酸链来表示（其中R＝A／G，Y＝C／T，M＝A／C，K＝G／T，S＝C／G，W＝ A／T，H＝ A／C／T，B＝ C／G／T，V＝A／C／G， D＝A/G /T,N=A／C／G/T），该具有简并性的核苷酸链必然包含上一步中找到的氨基酸保守区域的对应部分，在pp5中修改参数，令其在两个距离合适的保守的nt区域内寻找引物对，总之要保证上下游引物都落在该简并链的保守区域内，结果会有数对，分数越高越好。
五、对引物的修饰
若得到的引物为：
5-NAGSGNGCDTTANCABK-3
则其简并度＝4×2×4×3×4×3×2=2304，很明显该条引物的简并度多高不利于pcr。我们可以通过用次黄嘌呤代替N（因为次黄嘌呤能很好的和4种碱基配对）和根据物种密码子偏好这两种方法来降低简并度（有个查密码子偏好的数据库我以前发过大家搜索一下把）。
zui后，这样子设计出来简并引物对，适用于用于比对的氨基酸序列所属物种及与这些物种分类地位相同的其他物种。

hssnet定制DNA测序服务

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hssnet定制DNA测序服务

HSS以极短的周转时间和有竞争力的价格提供序列数据。测序基于高质量的寡聚合成技术。
HSS努力成为每个客户自己的测序部门。

 

Primer Walking

  长序列是通过Primer Walking方法和您提供的DNA样品确定的。
通过使用根据先前测序结果设计和合成的引物进行连续分析，可以获得高质量的数据。

 

 服务说明
服务说明
  对您提供的DNA样品进行了几次测序分析。
从测序结果中设计出新的引物，然后合成这些引物用于其他测序反应，因此通过重复此过程即可确定长序列。
有两种方法可供选择：单链测序（SSS）和双链测序（DSS），具体取决于应用程序。
  该服务包括；

-QC-
引物设计和合成
-测序反应
-测序仪运行
-数据检查
-组装数据生成
  试剂： BigDye*v3.1   BigDye Terminator v3.1
  设备： 3730xl DNA分析仪
    3130xl基因分析仪
 
 
  *标准序列数据在一个反应​​中包含约500个碱基。
   可以执行重复分析以涵盖需要分析的所有基础。
   例如）用于底漆行走（SSS）约。3.0kb序列；
   通常，大约。将进行6个反应。（3,000bp / 500bp每个反应= 6个反应。）

可交付成果
  该报告将通过网站和CD-R发送。

可交付成果
  -HSS合成引物
  -CD-R

中的CD-R
  数据-基本序列数据（文本文件）
  -原始数据（AB1文件）
  -组合数据
  -引物信息

*原始数据（Ab1文件）的免费查看器通知一阶。
*每个测序反应的进度报告可以根据要求通过电子邮件发送。
*请注意，网站上上传的数据将在大约之后删除。3个月。

 价格和国内订单交货时间
价格和国内订单交货时间
  价格和交货时间在不断变化，具体取决于所需的长度。以下价格包括引物设计和合成，测序分析和组装。
 
（不含税）
待分析长度 单股 交货时间 双链 交货时间
Uo至1.0kbp 22,000日圆 约 2周 44,000日圆 约 2周
Uo至1.5kbp 30,500日圆 约 3周 61,000日圆 约3周
Uo到2.0kbp 39,000日圆 78,000日圆
Uo到2.5kbp 56,000日圆 约 1个月 112,000日圆 约 1.5个月
Uo到3.0kbp 64,500日圆 129,000日圆
Uo至3.5kbp 73,000日圆 146,000日圆
Uo至4.0kbp 81,500日圆 163,000日圆
Uo到5.0kbp 107,000日圆 约 1.5-2
个月		 214,000日圆 约 2 
– 2.5个月
Uo至6.0kbp 124,000日圆 248,000日圆
Uo到7.0kbp 149,500日圆 299,000日圆
Uo到8.0kbp 166,500日圆 333,000日圆
Uo到9.0kbp 192,000日圆 384,000日圆
Uo至10.0kbp 234,500日圆 469,000日圆
  *样品数量和分析条件可能会影响交货。
   订购时请要求实际交付。
*对于已知序列的分析，可能会缩短交货时间。请向我们询问详细信息。

 

要求
 
DNA样本 质粒：浓缩； m / z。100-300ng / uL或更多，数量；根据需要* 1
PCR产物：浓缩；20ng / uL以上，数量；根据需要* 1,2
底漆
（定制底漆）		 对于任何类型的样品：浓度；10uM，数量；一次分析使用10uL或更多的Primer。
对于通用底漆，
电泳图像 请发送在同一凝胶上显示标记物和样品结果的图像及其数量说明。
  * 1所需的DNA样品量取决于分析长度。将1-5uL样品
    用于一个反应，该反应可生成约500个碱基的数据。请发送
    尽可能多的样品。

* 2对于PCR产物，请确保在PCR反应后进行纯化。有关我们的样品
    纯化服务，请单击此处以获取详细信息。
      有关详细信息，请参见以下链接。
    -如需样品制备，请单击此处。
    -有关电泳照片，请单击此处。
    -有关通用底漆的列表，请单击此处。
  * 3建议使用琼脂糖电泳来测量样品浓度。
    随订单一金畔送的电泳图像将用作选择反应条件的参考。
    请提供标记名称，在
    电泳图像上施加标记和样品的量。
  * 4请从自定义测序服务订购单上的Primer Walking计划中选择（SSS）或（DSS）。

optigene2024年价格表

发表于由

optigene2024年价格表

OptiGene成立的主要目标是提供最高质量的仪器和性能领x的试剂，以支持DNA和RNA的等温扩增。该合资企业的市场吸引力来自世界各地对现场测试，快速结果和床旁诊断日益增长的需求。 等温扩增技术(Isothermal Amplification Technology)是核酸体外扩增技术，其反应过程始终维持在恒定的温度下，通过添加不同活性的酶和各自特异性引物来达到快速核酸扩增的目的。常见的等温扩增技术有以下几种: * 环介导核酸等温扩增技术（LAMP） * 滚环扩增技术 RCA * 单引物等温扩增 SPIA * 依赖解旋酶的等温扩增技术 HDA * 链替代扩增 SDA * 交叉引物扩增技术 CPA GenieⅡ是开放的检测平台，应用“等温扩增技术”原理，结合荧光检测技术，可用于各类等温扩增反应在分子水平基础上检测**、病毒等微生物。功能强大、操作灵活的检测系统，使DNA、RNA的等温扩增实验在紧凑、便携模式下完成。运用特殊设计的反应管、*效的检测试剂结合GenieⅡ设备，提*了检测速度，简化了实验操作，为核酸检测提供了完整的解决方案。 GenieⅡ： 快速扩增，在15分钟内通过等温扩增法检测出目标DNA、RNA分子； 采用*灵敏度荧光检测系统； 由两个独立加热模块构成，分别控制两条8联排管，每个模块可以设置不同反应温度，保证反应温度准确性。

特别告知：为保证产品质量与良好性能，所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用！！！本次报价有效时间为2024年1月1日—2024年12月14日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
GSPM3-002HC 8000u GspM3.0 DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 6510.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-001 1600u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1601.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-002 8000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 6510.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-003 40000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 40000u 25987.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
ISO-001 Isothermal Master Mix – 400 reactions ea 8662.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
ISO-004 Fast Isothermal Master Mix – 300 reactions ea 8662.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
ISO-DR004 Fast Isothermal Master Mix – Dried reagents  300 reactions ea 9528.75 optigene 4-5周到货 上海金畔
GEN2-02 Genie II instrument complete with 150W mains power adaptor, power cable, USB cable, PC software and internal rechargeable battery. ea 218750.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GEN3-01 Genie III instrument complete with 150W mains power adaptor, power cable, USB cable, PC software and internal rechargeable battery. ea 168750.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-001 1600u Gsp Fast DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1391.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-002 8000u Gsp Fast DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-002HC 8000u Gsp Fast DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-003 40000u Gsp Fast DNA polymerase @ 8u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-003HC 40000u Gsp Fast DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPF-1ML-HC 100,000u Gsp Fast DNA polymerase @ 100u/µl 100,000u 51750.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM-001 1600u GspM DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1391.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM-002 8000u GspM DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM-002HC 8000u GspM DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM-003 40000u GspMDNA polymerase @ 8u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM-003HC 40000u GspM DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM2-001 1600u GspM2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1391.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM2-002 8000u GspM2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM2-002HC 8000u GspM2.0 DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM2-003 40000u GspM2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM2-003HC 40000u GspM2.0 DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-001 1600u GspM3.0 DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1601.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-002 8000u GspM3.0 DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 6510.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-003 40000u GspM3.0 DNA polymerase @ 8u/µl 40000u 25987.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-003HC 40000u GspM3.0 DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 25987.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-004 100,000u GspM3.0 DNA polymerase @ 8u/µl 100,000u 60637.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPM3-004HC 100,000u GspM3.0 DNA polymerase @ 100u/µl 100,000u 60637.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-001 1600u GspSSD DNA polymerase @ 8u/µl 1600u 1391.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-002 8000u GspSSD DNA polymerase @ 8u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-002HC 8000u GspSSD DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 5565.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-003 40000u GspSSD DNA polymerase @ 8u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-003HC 40000u GspSSD DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 22181.25 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-004 100,000u GspSSD DNA polymerase @ 8u/µl 100,000u 51750.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD-004HC 100,000u GspSSD DNA polymerase @ 100u/µl 100,000u 51750.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-002HC 8000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 100u/µl 8000u 6510.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-003HC 40000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 100u/µl 40000u 25987.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-004 100,000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 8u/µl 100,000u 60637.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
GSPSSD2-004HC 100,000u GspSSD2.0 DNA polymerase @ 100u/µl 100,000u 60637.50 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer1-001 2 x 1.5ml iBuffer 1 2×1.5ml 288.75 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer1-002 15ml iBuffer 1 15ml 735.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer2-001 2 x 1.5ml iBuffer 2 2×1.5ml 288.75 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer2-002 15ml iBuffer 2 15ml 735.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer3-001 2 x 1.5ml iBuffer 3 2×1.5ml 288.75 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer3-002 15ml iBuffer 3 15ml 735.00 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer4-001 2 x 1.5ml iBuffer 4 2×1.5ml 288.75 optigene 4-5周到货 上海金畔
iBuffer4-002 15ml iBuffer 4 15ml 735.00 optigene 4-5周到货 上海金畔

关键词：optigene、等温扩增、核酸体外扩增、LAMP、链替代扩增 SDA

genelink 26-4000-10说明书

发表于由

 

上海金畔genelink 26-4000-10说明书

Random Primers 5’ Phosphorylated

规格：50微克
运输条件：常温

随机引物5'磷酸化描述
随机引物是代表该大小的所有可能序列的寡核苷酸的混合物。与使用六聚体（1,2）和cDNA合成类似，随机引物可用于在低聚物标记中引发合成。随机引物标记产生高比活性标记DNA探针，可用于所有南方、北方和原位杂交研究。随机的
引物也可以类似于在cDNA合成中使用六聚体与寡聚体d（T）组合来产生更多的5'端cDNA
序列
最近，随机引物被用来检测DNA多态性。这些多态性，简单地被检测为DNA的片段，从父母一方扩增而不是从另一方扩增，以孟德尔的方式遗传，可用于构建多种物种的遗传图谱。作者建议，这些多态性被称为RAPD（发音快速）标记，在随机扩增多态性DNA之后（3）。
重建
建议在无核糖核酸酶的DEPC处理水中以50µM的浓度进行重组。
-短时间旋转试管，将运输过程中可能卡在瓶盖中的试管内容物卸下。颗粒可能非常小，不可见。


推荐用法
在20µl反应体积中，使用4µl 50µM溶液中的1µg DNA或RNA作为模板。
详见反应条件。
质量控制数据
使用逆转录酶和poly（A）+RNA作为模板，该产品被证明能够引发第一链cDNA反应，并且
使用klenow DNA聚合酶在随机引物标记反应中进行探针标记。
功能分析条件
下面给出的条件已经过测试，以产生第一链cDNA合成，并给出了一个例子。使用该产品的其他实验室已经使用了各种变体和其他方案，以产生出色的第一链合成。研究人员可以替代他们自己的反应条件。
RNA的质量对逆转录反应非常重要。必须有完整的全长RNA作为模板材料，不含微量RNA酶和污染性化学物质。低质量的RNA模板通常是导致cDNA产物截短和不完整的原因。
按照下面给出的顺序添加组件。反应体积可以放大。


genelink 26-4000-03说明书

发表于由

上海金畔genelink 26-4000-03说明书

Random Primers Unlabeled

数量100μg

运输条件下 室温

储存-20摄氏度

描述
随机引物是代表该大小的所有可能序列的寡核苷酸的混合物。与使用六聚体（1,2）和cDNA合成类似，随机引物可用于在低聚物标记中引发合成。
随机引物标记产生高比活性标记DNA探针，可用于所有南方、北方和原位杂交研究。随机引物也可以类似于在cDNA合成中使用六聚体与寡聚体d（T）组合来产生更多的5'端cDNA序列。
最近，随机引物被用来检测DNA多态性。这些多态性，简单地被检测为DNA的片段，从父母一方扩增而不是从另一方扩增，是以孟德尔的方式遗传的，可以
可用于构建多种物种的遗传图谱。作者建议，这些多态性被称为RAPD（发音快速）标记，在随机扩增多态性DNA之后（3）。
重建
建议在无核糖核酸酶的DEPC处理水中以50µM（50 pmol/µl）的浓度或10mM Tris pH 8.0进行重组。储备溶液可根据需要进一步稀释至适当的工作浓度。
为了制备50μM的底漆溶液，使用冻干低聚物的“nmol/100µg”值并乘以20，以确定要添加的稀释液体积（以微升计）。
公式：
“总nmol”x 20=要添加的稀释剂μl。
-短时间旋转试管，将运输过程中可能卡在瓶盖中的试管内容物卸下。
颗粒可能非常小，不可见。
-直接向试管中加入适量的无核糖核酸酶水或10mM Tris pH 8.0。旋涡。
-上述溶液为50µM。这相当于50 pmol/µl。
荧光标记探针应避光，以避免光漂白。
在零下20点储存
重建后C或以下。
推荐用法
在20µl反应体积中，使用4µl 50µM溶液中的1µg DNA或RNA作为模板。
详见反应条件。
质量控制数据
该产品通过逆转录酶和聚（A）蛋白被证明能引发第一链cDNA反应+
RNA作为模板
使用klenow DNA聚合酶在随机引物标记反应中进行探针标记。
功能分析条件
下面给出的条件已经过测试，以产生第一链cDNA合成，并给出了一个例子。使用该产品的其他实验室已经使用了各种变体和其他方案，以产生出色的第一链合成。研究人员可以替代他们自己的反应条件。
RNA的质量对逆转录反应非常重要。必须有完整的全长RNA作为模板材料，不含微量RNA酶和污染性化学物质。低质量的RNA模板通常是导致cDNA产物截短和不完整的原因。