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dharmacon CRISPR Guide RNA

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dharmacon CRISPR Guide RNA

CRISPR指南RNA

用于靶向基因敲除的慢病毒和合成试剂

指导RNAs程序Cas9核酸酶切割特定的基因组位置。设计有效的功能性指导RNA对于实现有效的基因敲除至关重要。

了解指导RNA产品的更多信息

  • 合成的crRNA

    预先设计或定制合成，用于跨越许多基因的快速敲除研究

  • 慢病毒sgRNA

    预先设计或定制的sgRNA作为甘油储备和高滴度纯化的慢病毒颗粒，用于小规模和大规模研究

  • 合成sgRNA

    用于CRISPR-Cas9基因编辑的定制单指导RNA寡核苷酸

 

  • 所有Edit-R预先设计的指导RNA（合成的crRNA和慢病毒sgRNA）都设计有经过验证的算法，以提高功能性敲除的可能性，而不仅仅是双链断裂（DSB）。通过评估数千种设计的功能表型，然后在其他测定系统中验证我们的设计规则，我们建立了确定更有可能提供特异性切割和功能性敲除的靶位点的规则。

    可以使用CRISPR设计工具为任何序列定制设计Edit-R合成sgRNA和crRNA 。

    CRISPR-Cas9系统中的指导RNA

    除了表达Cas9核酸酶之外，CRISPR-Cas9系统还需要特定的RNA部分来募集和指导核酸酶活性。这些指导RNA采用以下两种形式之一：

    • 长化学合成的反式激活CRISPR RNA（tracrRNA）加上化学合成的CRISPR RNA（crRNA），用于切割感兴趣的基因靶位点（图1a）
    • -要么-
    • 合成或表达的单一指导RNA（sgRNA），由crRNA和tracrRNA组成，作为单一构建体（图1b）

    图1a。由crRNA编程的Cas9核酸酶的插图：tracr复合物切割PAM的5'基因组DNA的两条链

    图1b。由sgRNA复合物编程的Cas9核酸酶的插图切割PAM的5'基因组DNA的两条链

 

 

RISPR指南RNA产品

合成指导RNA

  • Edit-R预先设计的crRNA

    保证编辑你的目标！算法优化的crRNA，用于人类，小鼠或大鼠基因的全基因组覆盖。核酸酶抗性的修饰改善了无DNA编辑。只需搜索您的基因！

  • Edit-R tracrRNA

    Edit-R反式激活CRISPR RNA（tracrRNA）是合成的，HPLC纯化的长RNA，需要与Edit-R crRNA一起使用以形成编程Cas9核酸酶的复合物。它经过核酸酶抗性修饰，可与修饰或未修饰的Edit-R crRNA一起使用。

  • Edit-R合成sgRNA

    定制合成100-mer单指导RNA，输入您自己的设计或使用我们灵活的设计工具

  • Edit-R合成阳性crRNA控制和检测引物

    针对特征良好的基因的物种特异性crRNA，以及错配检测分析引物，以确定基因编辑条件对大效率的有效性。

  • Edit-R合成crRNA非靶向对照

    非靶向对照以在缺乏基因靶特异性crRNA的情况下评估对CRISPR-Cas9组分的细胞应答。

  • Edit-R crRNA文库

    用于阵列敲除筛选的流行基因家族的预定义集合

  • 樱桃挑选图书馆

    有一个喜欢的基因列表？定制并订购预先设计的crRNA板，用于您感兴趣的目标中的敲除研究

 

一体化慢病毒sgRNA产品

  • Edit-R一体化慢病毒sgRNA

    全基因组结合Cas9和sgRNA，实现有效的基因敲除和的特异性; 可用作甘油原料和高滴度纯化颗粒。

  • Edit-R一体化慢病毒sgRNA阳性对照和试剂盒

    控制一体化慢病毒sgRNA以验证DNA双链断裂和基因编辑效率。

  • Edit-R一体化慢病毒sgRNA非靶向对照

    生物信息学设计和验证的一体化慢病毒sgRNA构建体不靶向人，小鼠或大鼠基因组中的任何基因。

 

慢病毒指南RNA

  • Edit-R预先设计了慢病毒sgRNA

    保证编辑你的目标！算法优化的sgRNA，用于人类，小鼠或大鼠基因的全基因组覆盖。提供高滴度的慢病毒颗粒和甘油储备。

  • Edit-R慢病毒sgRNA阳性对照

    针对特征良好的基因的物种特异性sgRNA，以确定基因编辑条件对大效率的有效性。

  • Edit-R慢病毒sgRNA非靶向对照

    非靶向对照以在缺乏基因靶特异性sgRNA的情况下评估对CRISPR-Cas9组分的细胞应答

  • Edit-R汇集慢病毒sgRNA文库

    用于人和小鼠中预定基因集的高滴度合并筛选文库。

  • Edit-R阵列慢病毒sgRNA文库

    用于高通量敲除筛选的整个人类基因家族的慢病毒sgRNA文库的阵列集合。

 

定制指南RNA设计和订购工具

  • CRISPR设计工具

    放置自定义指南RNA订单，或使用我们易于使用的界面设计和订购您自己的合成sgRNA，crRNA或慢病毒sgRNA。

 

HDR捐赠者模板设计和订购工具

  • Edit-R HDR捐赠设计师 – 寡头

    设计并订购单链DNA供体（≤150nt）用于插入，缺失或其他改变。

  • Edit-R HDR Donor Designer – 质粒

    设计并订购用于插入mKate2或EGFP荧光标记物或定制插入物的质粒DNA供体试剂盒

 

HDR捐赠者模板成套工具

  • Edit-R HDR质粒供体试剂盒

    快速且容易地组装用于HDR的质粒供体

  • Edit-R HDR质粒供体组件

    快速有效地构建HDR供体质粒

  • Edit-R HDR质粒供体引物

    Edit-R质粒供体试剂盒的PCR组件

 

指南RNA选择指南

为实验确定合适的指导RNA类型取决于您的特定实验或细胞类型。查看此表中的功能，开始选择宜指导RNA试剂。

  合成的crRNA 合成单指导RNA（sgRNA） 慢病毒sgRNA质粒（甘油原液） 慢病毒sgRNA颗粒
使用前将1：1与tracrRNA组合 ✔      
与Cas9 mRNA或蛋白质共电穿孔 ✔ ✔    
与Cas9 mRNA或蛋白质共转染 ✔ ✔ ✔  
创建稳定的细胞系
 		       ✔
用抗性标记富集群体     ✔ ✔
可用预先设计的功能敲除和特异性的验证算法 ✔   ✔ ✔
可从CRISPR设计工具处获得 – 在线设计 ✔ ✔ ✔ ✔

 

 

所有Edit-R预先设计的指导RNA（合成的crRNA和慢病毒sgRNA）都设计有经过验证的算法，以提高功能性敲除的可能性，而不仅仅是双链断裂（DSB）。

单独的位置不是CRISPR靶位点功能的指示

沿着VCP基因的编码序列的长度评估crRNA的功能性表明没有特定的模式，因为它涉及外显子位置，增强了设计算法表征功能特征的重要性。重组U2OS Ubi [G76V] -EGFP -Cas9细胞用266种不同的合成crRNA：tracrRNA复合物转染，靶向VCP基因沿着基因编码区的长度（使用DharmaFECT 4 Transfection Reagent，0.07μg/孔和50 nM合成crRNA） ：tracrRNA终浓度）。72小时后，使用Envision读板仪（Perkin Elmer）测量EGFP荧光。

具有来自Edit-R算法的高分数的crRNA具有比低评分设计更高的分裂效率

对10个基因（蓝色条）具有高功能评分的10个crRNA和对相同基因（黄色条）具有低功能评分的10个crRNA通过下一代测序进行编辑测试。93％的高评分crRNA和32％的低评分crRNA显示> 40％的编辑（插入缺失）。用50nM crRNA：tracrRNA转染Cas9-HEK293T细胞系，使用0.25μL/孔的DharmaFECT 1.转染后72小时，裂解细胞并且每个处理的细胞产生跨越每个crRNA位点的Nextera转座子适应的扩增子。样品以及来自未转染样品的匹配对照扩增子。使用Nextera 96​​孔索引试剂盒对样品进行索引，并合并用于在MiSeq仪器上进行测序（成对的末端读数，2×300长度）。通过NGS质量过滤标准的读数与参考文件（Bowtie2 v2.1.0）对齐。计算完整读数的百分比并将其标准化为对照未转染的样品（Samtools v0.1.12a）; 数据显示为已编辑的标准化百分比。

具有高算法的功能评分的crRNA在其他功能测定中也表现良好

将具有整合的Cas9（在CAG启动子下）的U2OS-蛋白酶体细胞以每孔10,000个细胞接种在96孔板中。铺板后24小时，使用0.2μg/孔的DF4，用25nM crRNA：tracrRNA转染细胞。使用ApoONE均相测定法（Promega）在转染后48小时分析细胞的凋亡。显示了在ApoONE测定中靶向BCL2L1，PLK1或WEE1的crRNA功能的箱形图表示。为了产生箱形图，基于它们的功能评分将crRNA分成下半部分（H1）和上半部分（H2）。中位数，下四分位数和上四分位数之间的数据分布以及小值和大值表明高得分的crRNA具有增加的功能。

mol-innov PYFI-200U说明书

发表于由

 

Molecular Innovations 成立于 1990 年，是研究抗体、蛋白质和 ELISA 试剂盒的主要制造商。我们专注于凝血和溶栓试剂，包括 PAI-1、tPA、尿激酶、凝血因子、玻连蛋白、纤维蛋白原、纤连蛋白、肾素原/肾素、前激肽释放酶、激肽释放酶、白蛋白、纤溶酶原、纤溶酶、抗纤溶酶、凝血酶、抗凝血酶、补体成分和免疫球蛋白. 我们提供全系列的分子生物学试剂，包括 DNA 聚合酶和感受态细胞。现在具有敲除小鼠和突变小鼠动物研究模型，例如 C1 抑制剂敲除（遗传性血管性水肿）、因子 IX 敲除（血友病 B）、前激肽释放酶敲除、点突变和转基因小鼠。我们的客户遍布全球，包括制药和生物技术公司以及主要研究机构。我们提供定制项目和批量报价。所有产品均在我们位于美国密歇根州诺维市的新工厂按照严格的质量控制标准制造。

mol-innov PYFI-200U说明书

PyFi 高保真 DNA 聚合酶

SKU：PYFI-200U 类别：DNA 聚合酶

产品描述

PyFi 高保真 DNA 聚合酶

PyFi 高保真 DNA 聚合酶是一种基因修饰的重组热稳定酶，从激烈的火球菌中克隆，与标准 Pfu 聚合酶相比，具有更高的持续合成能力和两倍的准确性。PyFi 包含完整的 3'-5' 校对功能，可将保真度提高到 Taq DNA 聚合酶的 50 倍。PyFi 比一些竞争对手更敏感，并创造出钝端的产品。适用于标准终点 PCR、平端克隆和高达 8.5kb 的 DNA 模板诱变。PyFi 经历了广泛的质量控制，并且没有污染的核酸内切酶。包括 10X 反应缓冲液。

附加信息

来源

大肠杆菌
分子量

90,000
贮存

-20℃
运输条件

冷包
形式

液体
缓冲

50% 甘油
应用

平端克隆,终点 PCR ,诱变

Creative Biogene转染的稳定细胞系简介

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Creative Biogene提供试剂盒，试剂和服务，以帮助研究人员探索有关基因发现，调控和功能的问题。

Creative Biogene转染的稳定细胞系简介

基因敲低稳定细胞系
基因敲除稳定细胞系
基因过表达

简单的介绍

具有特定基因过度表达或敲除作用的稳定细胞系在基因功能分析，靶标发现，靶标验证，分析开发和化合物筛选中非常有帮助。然而，稳定细胞系的产生是耗时且昂贵的过程。

Creative Biogene建立了一个稳定的细胞系生成专家团队。我们已经成功地产生了数百种稳定的细胞系，包括基因敲除，基因过表达和基因敲除细胞系。这些电池产品已经做好充分准备，可以满足我们客户的要求。此外，我们还可以提供Panoply TM细胞产品，以满足您的研究需求。

Creative Biogene的细胞系通过质粒转染/慢病毒转导，稳定细胞的选择，表达和功能筛选以及通过实时qRT-PCR或Western blot分析对构建体表达的最终验证而产生。

稳定细胞系生成协议：

  • 生成杀死曲线以确定*抗生素浓度
  • 用所需质粒构建体转染细胞
  • 选择并扩增稳定的多克隆菌落
  • 通过有限的稀释和扩增鉴定单个克隆
  • 转移克隆并评估表达
  • 扩增并冻结高表达克隆

我们转染的稳定细胞系的优势：

  • 经验丰富：定制的细胞生成项目由经验丰富的科学家在从设计到交付的整个过程中进行管理。
  • 具有成本效益： Creative Biogene以具有竞争力的价格为您节省金钱，并满足您的所有需求。
  • 可靠的细胞产品：通过为您提供可靠的细胞产品，Creative Biogene可以节省您的宝贵时间并加快研究速度。
  • 广泛的细胞类型： Creative Biogene提供不同的细胞类型，包括HEK293，HeLa，CHO，U2OS等。
  • 安全运输和快速交付

cellbiologics2024年价格表

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cellbiologics2024年价格表

Cell Biologics细胞生物制剂公司总部位于美国芝加哥，是全球d家提供Jackson Lab基因敲除小鼠原代细胞的专业公司，产品已获美国农业部SPF认证，并经中国进出口商品检验检疫局检验准许进口。

自 成立以来，Cell Biologics已开发出13个品系1,000多种可直接使用的JacksonLab基因敲除小鼠、正常野生型小鼠、大鼠原代细胞，必将填补细胞生物学 界研究的空白。另外，Cell Biologics拥有AAALAC认证的动物实验室，提供JacksonLab与国外其他著名实验室所有允许商用的基因敲除小鼠原代细胞分离服务。

特别告知：为保证产品质量与良好性能，所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用！！！本次报价有效时间为2024年1月23日—2024年12月14日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
6950 Gelatin-Based Coating Solution – Ready to Use 100ml 960 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H6621 Complete Human Epithelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2160 cellbiologics 4-6周 上海金畔
1166 Endothelial Cell Growth Supplement – ECGS (500X) 1ml 1840 cellbiologics 4-6周 上海金畔
C57-6023 C57BL/6 Mouse Primary Brain Microvascular Endothelial Cells 1x106Cells 9440 cellbiologics 4-6周 上海金畔
C57-6271F C57BL/6 Mouse Bone Marrow Monocytes 5x106Cells 6560 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M2267 Complete Fibroblast Medium /w Kit – 500 ML 500ml 1888 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6016 Human Primary Kidney Fibroblasts 0.5x106Cells 9280 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M6217 DMEM/Ham's F-12 (1:1 Mixture), With L-glutamine and HEPES 500mlx6 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M1266 Complete Endothelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 1888 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M2267SF Serum-Free Fibroblast Medium /w Kit – 500 ML 500ml 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M2268SF Serum-Free Smooth Muscle Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2048 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M6216 DMEM,with High Glucose, L-glutamine, Sodium Pyruvate and, 25mM HEPES 500mlx6 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6065 Human Primary Retinal Microvascular Endothelial Cells 0.5x106Cells 11680 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M6621 Complete Epithelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 1888 cellbiologics 4-6周 上海金畔
MK-6033 Cynomolgus Monkey Primary Tracheal Epithelial Cells 0.5x106Cells 10560 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M1168SF Serum-Free Endothelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 1888 cellbiologics 4-6周 上海金畔
M1168 Complete Endothelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2048 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6055 Human Primary Intestinal Mesenteric Vascular Endothelial Cells 0.5x106Cells 11680 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6035 Human Primary Mammary Epithelial Cells 0.5x106Cells 10560 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6023 Human Primary Brain Microvascular Endothelial Cells 0.5x106Cells 11680 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H-6011 Human Primary Lung Microvascular Endothelial Cells 0.5x106Cells 11680 cellbiologics 4-6周 上海金畔
C57-6231 C57BL/6 Mouse Primary Colonic Fibroblasts 0.5x106Cells 7520 cellbiologics 4-6周 上海金畔
C57-6013 C57BL/6 Mouse Primary Lung Fibroblasts 0.5x106Cells 7520 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6929 Endothelial Transwell Permeability Assay Kit 100assays 9760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6937 Myeloperoxidase Assay Kit 500assays 8160 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3391 Endothelial Cell Transfection Kit 100×6-wellRxns 6880 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3392 Endothelial Cell Transfection Kit 25×6-wellRxns 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3393 Epithelial Cell Transfection Kit 100×6-wellRxns 7200 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3395 Epithelial Cell Transfection Kit 25×6-wellRxns 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3396 Mesenchymal Cell Transfection Kit 100×6-wellRxns 6880 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB3397 Mesenchymal Cell Transfection Kit 25×6-wellRxns 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6969F BBB Permeability Kits – Fluo (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6969E BBB Permeability Kits – HRP (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6989F Intestinal Permeability Kits – Fluo (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6989E Intestinal Permeability Kits – HRP (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6939F Epithelial Permeability Kits – Fluo (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
CB6939E Epithelial Permeability Kits – HRP (24SPLPCinserts,100assays) 10400 cellbiologics 4-6周 上海金畔
R3380 Polybrene Infection / Transfection Reagent 2ml 1600 cellbiologics 4-6周 上海金畔
R3381 PEG Virus Precipitation Kit 100ml 4800 cellbiologics 4-6周 上海金畔
R3382 10xRBC lysis buffer 125ml 1040 cellbiologics 4-6周 上海金畔
R3383 10xAnnexin V binding buffer 125ml 1600 cellbiologics 4-6周 上海金畔
L6822 Cell Lysis Buffer (1X) 100ml 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
L6811 Tissue Lysis Buffer (1X) 100ml 1760 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H1168 Complete Human Endothelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H1168GPF Human Endothelial Cell Medium (Glucose and Phenol Red Free) – 500 ML 500ml 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H1168PF Human Endothelial Cell Medium (No Phenol Red) /w Kit – 500 ML 500ml 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H1168SF Serum-Free Human Endothelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2160 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H6621GPF Human Epithelial Cell Medium (Glucose and Phenol Red Free) /w Kit – 500 ML 500ml 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H6621PF Human Complete Epithelial Cell Medium (No Phenol Red) /w Kit – 500 ML 500ml 2320 cellbiologics 4-6周 上海金畔
H6621SF Serum-Free Epithelial Cell Medium /w Kit – 500 ML 500ml 2000 cellbiologics 4-6周 上海金畔



关键词：cellbiologics、内皮细胞、上皮细胞、肿瘤细胞、干细胞