bio-rad电转杯选购指南
Bio-Rad 高品质的电转杯为您宝贵的样品提供稳定的脉冲传送,确保结果的重复性。电击杯有3 种不同的电极间距 — 0.4、0.2 和0.1cm,针对不同的细胞类型选择理想的场强。电转杯的特点包括:
平滑的电极表面— 铝片经过11步严格的蚀刻和清洗处理,确保对整个样品的一致性脉冲传送
0.1 cm电转杯使用说明
1. 将0.1 cm电转杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的电击感受态细胞插入冰中5 分钟,待其融化,加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手拍打EP管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。
3. 用200 μl枪头(用刀切除0.5cm枪尖)将感受态-DNA混合物快速移到电转杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推荐的参数操作),将电转杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电转杯,放室温,加入不含抗生素的无菌培养基(室温),吹吸电转杯底部数次混匀后,转移到无菌的离心管中,根据不同菌种的复苏条件进行复苏及后续实验。
注意事项
1.电转杯的保存条件:
新的原装电击杯可在室温保存,使用过的电转杯放纯乙醇中保存。
2. 使用注意事项:
A,电转杯重复使用,内腔体容易吸附细胞膜碎片,造成电压不稳,转化效率降低。
B,尽量使用新的电转杯,在电转杯内腔产生污垢后及时清洗或丢弃,不可多次重复使用。
C,每次用完电转杯清洗时,应大力冲洗。
D,使用前,从乙醇中取出电转杯应放吸水纸去除乙醇后方可使用。
电击杯选购指南
0.4 cm 间距电转杯
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宽间距、低场强、应用于哺乳动物细胞和其它真核细胞
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0.2 cm 间距电转杯
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窄间距、高场强、应用于酵母、细菌和其它真核细胞
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0.1 cm 间距电转杯
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最窄间距、ji高的场强,浅底用于小体积样品(40–80 µl)应用于酵母和细菌转化
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