重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

发表于2024-11-02由上海金畔生物科技有限公司

重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

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参考文献

重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

◆概述

Kex-2（E.C.3.4.21.61）属于枯草杆菌蛋白酶家族，为酵母自身编码的一种前体加工酶，Ca²⁺ 依赖型丝氨酸蛋白酶，能够专一性地识别和切割Lys-Arg，Arg-Arg，Pro-Arg等双碱性氨基酸^※ 的羧基端肽键。不同于Trypsin，该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸（Arg或Lys）的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点，便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0，在偏酸性环境中稳定，稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃，酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂（如PMSF、TPCK等）抑制。

※碱性氨基酸：水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸，其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种：

中文名	英文名	缩写	符号	等电点
精氨酸	Arginine	Arg	R	10.76
赖氨酸	Lysine	Lys	K	9.74
组氨酸	Histidine	His	H	7.59

◆优势

●　单批次产量大，批间差小

●　高纯度，高比活性

●　无外源性病毒污染，无动物源生产原料

◆纯度

SDS-PAGE显示纯度>90%。

◆使用方法

溶解缓冲：20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca²⁺，pH 5.0~5.5。

酶切体系：50~100 mmol/L Tris，2 mmol/L Ca²⁺，pH 7.0~9.0；或HEPES，5 mmol/L Ca²⁺，pH 7.0~9.0；

推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：20~1：1000

◆保存条件

储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca²⁺，

储存稳定性：pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下，避免反复冻融；溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。

◆应用实例

RKex-2特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK，蛋白酶：合成多肽质量比1：1000，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。

重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

Peak#	R.T.	M.W.	Sequence
Peak 1	2.79 min	522.6	YGKR
Peak 2	6.26 min	445.56	LWK
Peak 3	6.94 min	950.15	YGKRLWK

◆产品信息

产品编号	产品名称	规格	比活
RKex20202	RKex2	10 mg	10 U/mg
RKex20204	RKex2	10 μg	10 U/mg

◆相关产品

产品编号	产品名称	规格	储存温度	检测范围
MDRK0201	RKex2 ELISA Kit 重组双碱性内肽酶检测试剂盒	96 孔	2～8 ℃	1.0～4000 ng/mL

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

BioDynamics DE110说明书

发表于2024-10-04由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔为BioDynamics特约经销商，BioDynamics实验室公司成立于1999年，开发用于生物研究的试剂和试剂盒。

来自嗜冷细菌的碱性磷酸酶

Alkaline Phosphatase from psychrophilic bacterium

来自嗜冷菌Shewanella sp。的碱性磷酸酶。SIB1（PAP）具有BAP和CIAP的优点。

	来自嗜冷菌Shewanella sp。的碱性磷酸酶。SIB1（PAP）可以很容易地作为SAP和CIAP进行热灭活。另一方面，即使通过苯酚提取，BAP也不容易失活。请参考这个地方
	因为酶在60℃下的活性是在37℃下的活性的约4倍，所以酶不仅可以从突出的3'端除去磷酸盐，而且可以在60℃下从钝端或凹入的5'端除去30分钟。（另一方面，SAP和CIAP在60°C时迅速失活。）

DynaZyme

码	产品名称
DE110	来自Shewanella.sp的碱性磷酸酶（PAP）。SIB1

PAP的优点
尽管BAP难以灭活，但PAP很容易被热灭活。

如下图所示，PAP处理在平板上产生比转化后的BAP处理更多的白色菌落。因为活性BAP在灭活处理后存活，活性BAP在连接反应期间除去插入DNA的磷酸盐并导致连接效率降低。实验表明，PAP在结扎前很容易灭活，但不能在BAP中灭活。为了在BAP处理后获得足够量的白色菌落，插入DNA必须以高插入量：载体比例加入到ligaton反应中以克服存活的BAP或必须进行两次以上的苯酚提取。

将1μgEcoRI切割的pBluescript SK（+）载体用0.5单位BAP或5单位PAP在37℃去磷酸化。去磷酸化后，将反应混合物处理如下，

	1。	未处理：将反应混合物直接用于连接反应。
	2。	苯酚：向反应混合物中加入等体积的苯酚并将其涡旋30秒。然后用yi醚萃取混合物，并用乙醇沉淀。将沉淀物干燥并用dH ₂ O 溶解。将其用于连接反应。
	3。	加热：反应混合物仅在95℃下加热5分钟用于PAP，或在100℃加热5分钟用于BAP。这些直接用于连接反应。

在上述处理后，将EcoRI切割的去磷酸化的pBluescript SK（+）载体连接到1kb插入DNA片段上。用连接产物转化感受态XL1-Blues。白色菌落的数量如图所示。

DNA Size Marker
	DM112	DynaMarker® DNA Low D
	DM122	DynaMarker® DNA High D
	DM132	DynaMarker® for Plasmid D
	DM100	DynaMarker® DNA Small
	DM310	λHind III Marker

DNA Loading Dye
	DM210	6×BPB Loading Dye

New Type Colored Size Molecular Weight Marker
	DM253	DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus
	DM260	DynaMarker® Prestain Marker for RNA High
	DM270	DynaMarker® DIG Labeled Blue Color Marker for Small RNA

RNA Size Marker
	DM152	DynaMarker® RNA Low II
	DM157	DynaMarker® RNA Low II Easy Load
	DM160	DynaMarker® RNA High
	DM170	DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
	DM180	DynaMarker® dsRNA
	DM185	DynaMarker® dsRNA Easy Load
	DM192	DynaMarker® Small RNA II
	DM197	DynaMarker® Small RNA II Easy Load

Protein Size Marker
	DM610	DynaMarker® Protein Eco
	DM625	DynaMarker® Protein BlueRed
	DM637	DynaMarker® Protein MultiColor III
	DM660	DynaMarker® Protein MultiColor Stable
	DM670	DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range
DynaZyme
	DE110	Alkaline Phosphatase
		from psychrophilic bacterium
DynaExpress
	DS610	Long ssDNA Preparation Kit
	DS620	Long ssDNA Preparation Kit
	DP100	ProteinChecker
	DS500	QuickBlue Staining Solution
Other reagents for molecular biology
	DR110	DEPC-treated Water, 1 ml Χ 5
	DR115	DEPC-treated Water, 50 ml Χ 2
	DR117	DEPC-treated Water, 500 ml
	DR120	RNase-free Water, non DEPC, 1 ml Χ 5
	DR125	RNase-free Water, non DEPC, 50 ml Χ 2
	DR127	RNase-free Water, non DEPC, 500 ml
	F012	DNA, Salmon Sperm, Sonicated
	F008	Anti-6 × Histidine Antibody

上海金畔生物科技有限公司是专业从事生物技术产品销售的高科技企业，是国内生物试剂、仪器、消耗品领域的企业之一。金畔公司自成立以来，连续10年高速成长。公司的发展目标是建成专业从事生物技术产品销售、生产与开发的公司。

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

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6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发，欢迎合作。

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LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

发表于2024-09-28由上海金畔生物科技有限公司

LabAssay™ ALP
LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

LabAssay™ ALP

LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

碱性磷酸酶的活性检测试剂盒，常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶（ALP）广泛分布于肝脏、骨和小肠之中。组织中酶活性的变化是成骨等生理现象的重要标志。在骨代谢研究领域被用作骨形成指标之一。

本产品是以对硝基苯磷酸盐为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒，通过使用酶标仪进行多样品检测。

◆检测原理

碱性磷酸酶存在下，碳酸盐缓冲溶液（pH 9.8）中的对硝基苯磷酸盐分解成对硝基苯酚和磷酸，产生的对硝基苯酚在碱性条件下呈黄色。通过测量405 nm处的吸光度，可以计算样品中的碱性磷酸酶活性。

LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

◆产品性能

检测范围：>0.06 mmol/L

标准曲线范围：0.0625~0.5 mmol/L

重复性：C.V.<10%

样品：血清（小鼠、大鼠、人）

所需样品量：20 μL

检测时间：约20min

检测波长：405 nm

◆试剂盒成分

底物片（溶解时对硝基苯基磷酸二钠 6.7 mmol/L)	10 片
底物溶解buffer （2.0 mmol/L 氯化镁含有 0.1 mol/L 碳酸盐缓冲液 pH 9.8)	50 mL × 1瓶
反应终止液（0.2 mol/L氢氧化钠溶液）	50 mL × 1瓶
标准溶液　(0.5 mmol/L 对硝基苯酚溶液）	5 mL × 1瓶

◆标准曲线示例

◆检测操作方法

根据下表中的条件进行反应。

	Test	标准	空白
底物缓冲液	100 μL	100 μL	100 μL
待测物	样品20 μL	标准溶液20 μL	蒸馏水 20 μL
孔板混匀仪中震荡1 min，37°C下孵育15 min。
反应终止液	80 μL	80 μL	80 μL
孔板混匀仪中震荡1 min，使用酶标仪测量405 nm处吸光度

◆数据

加标回收测试

ALP的加标回收测试，将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中，n=2。

●　人血清样品

添加量(mmol/L)	平均值(mmol/L)	回收量(mmol/L)	回收率（%）
－	0.429	－	－
0.097	0.527	0.098	101
0.197	0.587	0.158	80.2
0.297	0.672	0.243	81.8
0.507	0.866	0.437	86.2

●　小鼠血清样品

添加量(mmol/L)	平均值(mmol/L)	回收量(mmol/L)	回收率（%）
－	0.284	－	－
0.060	0.343	0.059	98.3
0.127	0.399	0.115	90.6
0.251	0.507	0.223	88.8
0.500	0.753	0.469	93.8

●　大鼠血清样品

添加量(mmol/L)	平均值(mmol/L)	回收量(mmol/L)	回收率（%）
－	0.374	－	－
0.060	0.439	0.065	108.3
0.127	0.483	0.109	85.8
0.251	0.598	0.224	89.2
0.500	0.855	0.481	96.2

稀释线性度测试

使用随附的缓冲液制备样品，使其处于检测范围内，用缓冲液连续梯度稀释4次，并检测结果。

●　人血清样品

●　小鼠血清样品

●　大鼠血清样品

样品检测案例

●　人样品

样品	检测值 (mean)	SD	CV (%)
混合血清，男性	0.556	0.003	0.5
混合血浆(EDTA)，男性	0.07	0.001	1.2

※抗凝固剂的EDTA会产生负误差，所以请不要使用。

●　小鼠样品：CD-1(ICR)、雄性、血清

样品	检测值 (mean)	SD	CV (%)
No.1	0.31	0.013	4.2
No.2	0.453	0.001	0.2
No.3	0.495	0.015	3
No.4	0.442	0.013	2.9
No.5	0.373	0.002	0.5

●　大鼠样品：SD、雄性、血清

样品	检测值(mean)	SD	CV (%)
No.1	0.538	0.005	1
No.2	0.441	0.01	2.2
No.3	0.357	0	0
No.4	0.46	0.002	0.5
No.5	0.301	0.011	3.6

单位：mmol/L, n=2

点击了解LabAssay™全系列

※ 产品已更新，旧编号为：291-58601

参考文献

●　Ito, S. et al. : J. Pharmacol. Exp. Ther., 333, 341 (2010).　※小鼠肾组织提取液

●　Matsuyama, A. et al. : Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 45, 75 (2018).　※MC3T3-E1细胞, C2C12细胞

●　Chiba, T. et al. : J. Atheroscler. Thromb., 23, 1099 (2016).　※小鼠血浆

●　Kohno, Y. et al. : Stem Cell Res. Ther., 8, 115 (2017).　※骨膜间充质干细胞

●　Iwakura, T. et al. : J. Orthop. Res., 27, 208 (2009).　※人培养细胞提取液

●　Furuya, Y. et al. : J. Biol. Chem., 286, 37023 (2011).　※小鼠血清

●　Itoh, T. et al. : J. Biol. Chem., 284, 19272 (2009).　※小鼠培养细胞提取液

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
633-51021	LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒	500 tests	for Cellbiology	–

重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒

发表于2024-08-31由上海金畔生物科技有限公司

重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒

◆原理

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中双碱性氨基酸内肽酶的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，往酶标板中加入标准品和检测样品，与检测抗体桥联结合，再加入辣根过氧化物酶标记物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算待测样品中双碱性氨基酸内肽酶的残留量。

◆特点

●　高灵敏度，能检测低至0.98 ng/mL的双碱性氨基酸内肽酶残留

●　采用双抗体夹心法，特异性更高，能检测不同来源的双碱性氨基酸内肽酶

●　提供预包被的96孔板，检测更稳定

●　可拆卸的96孔板，操作更灵活

●　适用于重组蛋白药物残留检测

◆操作流程

◆产品信息

重组蛋白药物或融合表达工艺中，使用到了重组或天然的双碱性氨基酸内肽酶进行酶切，可以以本试剂盒进行以检测样品中微量双碱性氨基酸内肽酶残留量。

样品类型	重组蛋白药物
检测范围	0.98 ng/mL～4000 ng/mL
检测对象	天然提取或重组表达的双碱性氨基酸内肽酶： imed 重组双碱性内肽酶（产品编号：RKex20202） imed 重组双碱性内肽酶（产品编号：RKex20204）
特点	●　可进行定量检测 ●　高灵敏度 ●　高特异性 ●　预包被ELISA板（可拆卸），使用方便 ●　可用于自动化
有效期	12个月

◆产品列表

产品编号

产品名称

产品规格

MDRK0201

RKex2 ELISA Kit

重组双碱性内肽酶检测试剂盒

96 wells

◆相关产品

产品编号	产品名称	规格	比活
RKex20202	RKex2	10 mg	10 U/mg
RKex20204	RKex2	10 μg	10 U/mg

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

低水分有机碱性试剂

发表于2024-03-30由上海金畔生物科技有限公司

低水分有机碱性试剂

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

低水分有机碱性试剂

低水分、高活性的碱性化合物

　　有机碱性化合物是有机合成过程中重要的反应物之一，应根据基质的pKa值适量使用反应剂。然而，多数的碱性化合物较易与水发生反应，并因此失去活性，严重影响反应的再现性。

　　富士胶片和光推出可保证低水分的碱性溶液系列产品。各个容量都能够使用注射器抽取，因此可实现在操作过程中不接触空气中的水分。

◆特点

●　使容易潮解的碱性化合物能够在低水分、高活性的状态下使用。

●　可用注射器进行抽取，能够长期保持试剂的纯度。（采用与超脱水（法）相同的帽结构）

低水分有机碱性试剂

◆各溶剂中的pKa值

　　pKa值越高，其碱性越强。

低水分有机碱性试剂

规格例：1.0moL/L t-BuOK，THF溶液

外观	适合实验
密度（20℃）	0.903~0.907 g/mL
水分	0.1%以下
浓度	0.8~1.1 moL/L
IR(ATR法)	适合实验
钾	适合实验

包装容器

低水分有机碱性试剂

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
128-06651	1.0moL/L Lithium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇锂四氢呋喃溶液	50 mL	－	－
124-06653	1.0moL/L Lithium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇锂四氢呋喃溶液	250 mL	－	－
192-18241	1.0moL/L Sodium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇钠四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
194-18245	1.0moL/L Sodium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇钠四氢呋喃溶液	500 mL	－	－
169-27901	1.0mol/l Potassium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇钾四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
161-27905	1.0mol/l Potassium t-Butoxide Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L叔丁醇钾四氢呋喃溶液	500 mL	－	－
047-34221	1.0mol/l 1,5-Diazabicyclo[4.3.0]-5-nonene Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L 1,5-二氮杂双环[4.3.0] – 5-壬烯四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
049-34225	1.0mol/l 1,5-Diazabicyclo[4.3.0]-5-nonene Tetrahydrofuran Solution 1.0mol/L 1,5-二氮杂双环[4.3.0] – 5-壬烯四氢呋喃溶液	500 mL	－	－
042-34151	1.0mol/l 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene Tetrahydrofuran Solution 1.0mol / l 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
044-34155	1.0mol/l 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene Tetrahydrofuran Solution 1.0mol / l 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯四氢呋喃溶液	500 mL	－	－
040-34211	1.0mol/l 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octane Tetrahydrofuran Solution 1.0mol / l 1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
042-34215	1.0mol/l 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octane Tetrahydrofuran Solution 1.0mol / l 1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷四氢呋喃溶液	500 mL	－	－
043-34201	0.5mol/l 4-Dimethylaminopyridine Tetrahydrofuran Solution 0.5mol / L的4-二甲氨基吡啶的四氢呋喃溶液	100 mL	－	－
045-34205	0.5mol/l 4-Dimethylaminopyridine Tetrahydrofuran Solution 0.5mol / L的4-二甲氨基吡啶的四氢呋喃溶液	500 mL	－	－

Research Diets动物饲料官网代理商

鼠一鼠二 MolDiets 模尔美迪森小鼠猴子实验动物造模饲料定制

标签归档：碱性

重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

BioDynamics DE110说明书

上海金畔为BioDynamics特约经销商，BioDynamics实验室公司成立于1999年，开发用于生物研究的试剂和试剂盒。

LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

●　大鼠样品：SD、雄性、血清

重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒

低水分有机碱性试剂

2024年 11月
一	二	三	四	五	六	日
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4	5	6	7	8	9	10
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18	19	20	21	22	23	24
25	26	27	28	29	30

上海金畔为BioDynamics特约经销商，BioDynamics实验室公司成立于1999年，开发用于生物研究的试剂和试剂盒。

● 大鼠样品：SD、雄性、血清

●　大鼠样品：SD、雄性、血清