Quickzyme QZBhypro1 说明书

Quickzyme QZBhypro1 说明书

Hydroxyproline Assay Kit

羟脯氨酸检测试剂盒

用于分析胶原蛋白和羟脯氨酸

QuickZyme羟脯氨酸测定用于定量测定羟脯氨酸。羟脯氨酸由胶原的(酸)水解产生。通常对于水解时的分析需要除去HCl,这是耗时的步骤和/或需要特殊设备。QuickZyme羟脯氨酸检测试剂盒是仅有的一种不需要这一费力步骤的羟脯氨酸检测试剂,可快速(<2小时),灵敏且容易(96孔板形式)检测。

羟脯氨酸检测规格

  • 羟脯氨酸的定量测量。
  • 样品:酸水解的组织培养上清液,细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色测量
  • 范围:6至300μM。灵敏度:2.4μM(0.3μg/ ml)
  • 使用羟脯氨酸作为标准
  • 易于使用:相当于ELISA
  • 在室温下储存
  • 该试剂盒不含有试管和胶原蛋白水解方案。如果您需要这些物品,请订购QuickZyme总胶原蛋白测定

One 96 well plate kit  .
Two 96 well plate kits .
Five plate bulk kit .

€   304    .
€   573   .
€ 1159   .

QZBhypro1
QZBhypro2
QZBhypro5

 

货号

品名

规格

欧元价

QZBtotcol1

total collagen assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

325

QZBtotcol2

total collagen assay kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

615

QZBtotcol5

total collagen assay kit 5x 96-assays bulk pack

5 plates 480 assays

1217

QZBtiscol1

sensitive tissue collagen assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

405

QZBtiscol2

sensitive tissue collagen assay kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

765

QZBtiscol5

sensitive tissue collagen assay kit 5x 96-assays bulk pack

5 plates 480 assays

1515

QZBcol1-1

soluble collagen assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

325

QZBcol1-2

soluble collagen assay kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

615

QZBcol1-5

soluble collagen assay kit 5x 96-assays

5 plates 480 assays

1217

QZBhypro1

hydroxyproline assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

313

QZBhypro2

hydroxyproline assay kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

591

QZBhypro5

hydroxyproline assay kit 5x 96-assays bulk pack

5 plates 480 assays

1193

QZBtishyp1

sensitive tissue hydroxyproline kit 96-assays

1 plate 96 assays

395

QZBtishyp2

sensitive tissue hydroxyproline kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

745

QZBtishyp5

sensitive tissue hydroxyproline kit 5x 96-assays bulk pack

5 plates 480 assays

1506

QZBtotprot1

total protein assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

278

QZBtotprot2

total protein assay kit 2x 96-assays

2 plates 192 assays

525

QZBtotprot5

total protein assay kit 5x 96-assays bulk pack

5 plates 480 assays

1038

QZBmmp2H

human MMP-2 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp2Hv2

human MMP-2 activity assay kit 96-assays version 2

1 plate 96 assays

549

QZBmmp2M

mouse MMP-2 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp8H

human MMP-8 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp9H

human MMP-9 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp9M

mouse MMP-9 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZMmmp7H

human MMP-7 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp7M

mouse MMP-7 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBmmp14H

human MMP-14 activity assay kit 96-assays

1 plate 96 assays

499

QZBGrB5

human granzyme B activity assay reagent set

5 plates 480 assays

806

QZBGrB2

human granzyme B activity assay reagent set

2 plates 192 assays

549

QZBMR15-2-100

Human mannose receptor (CD206) Mab

100 ug IgG

259

QZBMR15-2-500

Human mannose receptor (CD206) Mab

500 ug IgG

746

QZBMMP9S22.2-100

Human MMP-9 Mab

100 ug IgG

272

QZBMMP9S22.2-500

Human MMP-9 Mab

500 ug IgG

782

QZBFBDDE2

Human fibrin degradation products plm generated Mab

  10 ug IgG

187

QZBFBDDE2

Human fibrin degradation products plm generated Mab

100 ug IgG

283

QZBFBDDE2

Human fibrin degradation products plm generated Mab

500 ug IgG

766

QZBFBDD13

Human fibrin fragment D-dimer Mab

  10 ug IgG

187

QZBFBDD13

Human fibrin fragment D-dimer Mab

100 ug IgG

283

QZBFBDD13

Human fibrin fragment D-dimer Mab

500 ug IgG

766

QZBFBY22

Human fibrin Mab

  10 ug IgG

187

QZBFBY22

Human fibrin Mab

100 ug IgG

283

QZBFBY22

Human fibrin Mab

500 ug IgG

766

QZBFDP14-3-7

Human fibrin(ogen) degradation products Mab

  10 ug IgG

187

QZBFDP14-3-7

Human fibrin(ogen) degradation products Mab

100 ug IgG

283

QZBFDP14-3-7

Human fibrin(ogen) degradation products Mab

500 ug IgG

766

QZBFBG8-1-2

Human intact fibrinogen Mab

  10 ug IgG

187

QZBFBG8-1-2

Human intact fibrinogen Mab

100 ug IgG

283

QZBFBG8-1-2

Human intact fibrinogen Mab

500 ug IgG

766

QZBFBY18-4

Human fibrinogen Mab

  10 ug IgM

187

QZBFBY18-4

Human fibrinogen Mab

100 ug IgM

283

QZBFBY18-4

Human fibrinogen Mab

500 ug IgM

766

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

Quickzyme QZBtotcol1说明书

Quickzyme QZBtotcol1说明书

Total Collagen Assay

Total Collagen测定试剂盒基于通过胶原酸水解获得的羟脯氨酸残基的定量比色测定。通常对于该分析在水解时需要除去HCl,这是耗时的步骤和/或需要特殊设备。QuickZyme Total Collagen测定是仅有的一种不需要这个费力步骤的基于羟脯氨酸的测定,导致在水解步骤后快速(<2小时)和容易(96孔板形式)测定。

  总胶原蛋白测定规格

  • 定量测量所有类型的胶原蛋白,物种独立。
  • 样品:组织培养上清液,细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色测定羟脯氨酸含量
  • 范围:6至300μg/ ml。灵敏度:2.5μg/ ml
  • 使用鼠尾胶原作为标准
  • 易于使用:相当于ELISA
  • 在室温下储存
  •  

One 96 well plate kit   .
Two 96 well plate kits  .
Five plate bulk kit         .

€   316     .
€   597     .
€ 1182   

QZBtotcol1
QZBtotcol2
QZBtotcol5

各种类型和各种形式胶原蛋白的定量测定

·物种独立

·在570 nm处进行比色读出

·快速和容易

·大动态范围

基于羟脯氨酸的分析

·与提取方法无关

不需要特殊设备!

化验规格

动态范围:6-300微克/毫升

灵敏度:2.5微克/毫升

样本量:50-500升

格式:96井板

预期用途:非常广泛

应用:条件培养基细胞/细胞提取物、组织/组织提取物、种类独立的胶原类型无关。

 

定量测量,数量测量

 

测定原理

 

这盒子里是什么?

 

标准,缓冲器和板包括在内。水解管,微效价板,胶原标准,缓冲液,检测试剂,板封。不包括HCL。

 

相关分析

 

可溶性胶原试验

 

-羟脯氨酸测定

 

-人和小鼠MMP-9活性测定

 

-人和小鼠MMP-2活性测

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

quickzyme 总胶原测定说明书

quickzyme 总胶原测定说明书

 
现在,任何生化实验室都可以轻松确定胶原蛋白

 

总胶原蛋白测定试剂盒基于对胶原蛋白进行酸水解而获得的羟脯氨酸残留的定量比色测定。通常,对于该分析,需要在水解时去除HCl,这是一个耗时的步骤,并且/或者需要特殊的设备。QuickZyme总胶原蛋白测定法是不需要此繁琐步骤的基于羟脯氨酸的测定法,可在水解步骤后进行快速(<2小时)且简便(96孔板形式)的测定。

 

胶原蛋白测定总规格

  • 定量测量所有类型的胶原蛋白,种类无关。
  • 样品:细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色法测定羟脯氨酸含量
  • 范围:6至300μg/ ml。灵敏度:2.5 µg / ml
  • 以鼠尾胶原蛋白为标准
  • 易用性:相当于ELISA
  • 室温保存

价格/产品编号-订单

一个96孔板套件   。
两个96孔板套件  。
五盘散装工具包         。
342欧元    。
646欧元    。
1279欧元  。
QZBtotcol1 –单击以订购
QZBtotcol2 –单击以订购
QZBtotcol5 –单击以订购

更多信息

产品介绍:产品单共胶原蛋白测定
分析手册:  手动总胶原检测试剂盒
MSDS:1,2,3,4,5
应用说明1:如何选择你的胶原蛋白测定?
应用说明2:如何测量小鼠组织中的胶原蛋白?
应用说明3:鱼组织中的胶原蛋白分析
应用说明4:新鲜,冷冻和福尔马林固定组织中每种蛋白的胶原蛋白分析
其他信息1:海报“轻松测量组织中的胶原蛋白”
其他信息2:海报“组织和组织切片中的胶原蛋白分析”
其他信息3:海报“细胞培养物和组织中的胶原蛋白定量”
其他信息4:海报“组织中的胶原蛋白分析:总胶原蛋白与动态胶原蛋白分析”
其他信息5:海报“比较胶原蛋白”早期纤维化的分析方法”
其他信息6:海报“轻松准确地分析NASH纤维化中的胶原蛋白”

quickzyme QZBhypro1说明书

 

quickzyme QZBhypro1说明书

羟脯氨酸检测试剂盒

Hydroxyproline Assay Kit

用于分析胶原蛋白和羟脯氨酸

 

QuickZyme羟脯氨酸测定法用于定量测定羟脯氨酸。羟脯氨酸来自胶原蛋白的(酸)水解。通常,对于该分析,需要水解除去HCl,这是一个耗时的步骤,并且/或者需要特殊的设备。QuickZyme羟脯氨酸测定试剂盒是仅有不需要此繁琐步骤的基于羟脯氨酸的测定,因此可进行快速(<2小时),灵敏且容易(96孔板形式)的测定。

 

羟脯氨酸分析规格

  • 羟脯氨酸的定量测量。
  • 样品:酸水解的组织培养上清液,细胞提取物,组织匀浆和组织。
  • 比色法
  • 范围:6至300μM。灵敏度:2.4 µM(0.3 µg / ml)
  • 以羟脯氨酸为标准
  • 易用性:相当于ELISA
  • 室温储存
  • 该试剂盒不包含试管或胶原蛋白水解方案。

 

价格/产品编号-订单

一个96孔板套件   
两个96孔板套件  
五盘散装套件  
313欧元    
€591   
1193欧元   
QZBhypro1
QZBhypro2
QZBhypro5 

•定量测量
羟脯氨酸
•570 nm下的比色读出
•简单快捷
•敏感
•可用于胶原蛋白分析
在所有类型的组织中
分析规格
动态范围:6-300微米
灵敏度:2.4微米
样品体积:5-35微升
格式:96孔板
用途:非常广泛的应用:
条件培养基
细胞/细胞提取物
组织/组织提取物
物种独立
胶原类型无关

盒子里有什么?
包括标准、缓冲器和板。
微量滴定板,羟脯氨酸标准,
分析缓冲液,检测试剂,印版。
不包括盐酸。
羟脯氨酸检测试剂盒
定量测量
二十
相关分析
-可溶性胶原测定
-胶原蛋白总量测定
-人和小鼠MMP-9活性测定
-人和小鼠MMP-2活性测定

 

Quickzyme QZBtotcol1现货使用说明书

QuickZyme Biosciences是一家创新的生命科学公司,为研究界提供新颖*的产品,这些产品在基质相关蛋白,酶和测定法领域具有附加值。

 

上海金畔Quickzyme QZBtotcol1现货使用说明书

 

介绍

胶原是细胞外基质的主要成分之一。胶原生成的失调会导致纤维化(过多的胶原)或骨关节炎(过少的胶原)等病理变化。

因此,在许多情况下,胶原蛋白的测定是很重要的

疾病相关研究。

quickzyme总胶原测定是基于羟脯氨酸的检测。羟脯氨酸是一种非蛋白性氨基酸,存在于哺乳动物的弹性蛋白和胶原蛋白中。它的存在主要局限于胶原的三螺旋,在那里它的存在增加了三螺旋的稳定性。羟脯氨酸是在脯氨酸羟化酶的作用下由特定的脯氨酸残基翻译后形成的。组织水解物中的羟脯氨酸可以直接测量胶原蛋白的含量。

胶原的测定是从组织样品在95oC的6M HCl中*水解开始的。水解产物中的羟脯氨酸残基通过对prockop和udenfriend(anal)所述方法的改进进行定量。Biochem.,1960,1:228-239)。该分析测量了样品中羟脯氨酸的总量,它代表了样品中存在的所有类型的胶原,而不区分胶原类型和前胶原、成熟胶原和胶原降解。

产品

该测定是简单的,并且结果在570 nm处具有大的吸光度。这种分析方法的发展使得它不需要酸水解后的干燥步骤,而酸水解通常需要特殊的设备。

Total Collagen Assay

总胶原测定

 

总胶原蛋白测定试剂盒基于对胶原蛋白进行酸水解而获得的羟脯氨酸残留的定量比色测定。通常,对于该分析,需要水解除去HCl,这是一个耗时的步骤,并且/或者需要特殊的设备。QuickZyme总胶原蛋白测定法是仅有不需要此繁琐步骤的基于羟脯氨酸的测定法,可在水解步骤后进行快速(<2小时)且简便(96孔板形式)的测定。

胶原蛋白测定总规格

  • 定量测量所有类型的胶原蛋白,种类无关。
  • 样品:细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色法测定羟脯氨酸含量
  • 范围:6至300μg/ ml。灵敏度:2.5 µg / ml
  • 以鼠尾胶原蛋白为标准
  • 易用性:相当于ELISA
  • 室温保存

价格/产品编号-订单

One 96 well plate kit  
Two 96 well plate kits  .
Five plate bulk kit          
325欧元     
615欧元     
€1217   
QZBtotcol1
QZBtotcol2 
QZBtotcol5

各种胶原的定量测定

•与物种无关

•570 nm下的比色读出

•快速简便

•动态范围广

•基于羟脯氨酸的分析

•独立于提取方法

•无需特殊设备!

 

分析规格

动态范围:6-300微克/毫升

灵敏度:2.5微克/毫升

样品体积:50-500微升

格式:96孔板

用途:非常广泛的应用:条件培养基

细胞/细胞提取物组织/组织提取物物种无关胶原类型无关

盒子里有什么?

包括标准、缓冲器和板。水解管,微量板,胶原蛋白标准品,缓冲液,检测试剂,板封。不包括盐酸。

其他所需材料

需要但不提供以下材料和设备:

•12M和6M HCl用于样品水解

•4M HCl用于样品和标准稀释

•单通道和/或多通道移液管

•Eppendorf离心机

•恒温箱(或温度计或校准烤箱),用于在95摄氏度(不高于!)

•在60℃下加热的培养箱

•可在540至580纳米之间测量波长的微板阅读器,优选570纳米。

•微孔板振动筛

•聚丙烯、聚乙烯或玻璃管(不含聚苯乙烯)

 

定量测量

储存条件

未打开的工具包:

在黑暗中室温(RT)下储存。不要使用超过套件有效期的套件组件。

打开的试剂盒/重组试剂:

打开的胶原蛋白标准品和分析缓冲液应在4℃下避光保存。其他打开的试剂应在室温下避光保存,并至少稳定1个月。重组检测试剂(A+B)应在重组当天使用。

预防措施

该试剂盒含有正丙醇、高氯酸、乙酸和二甲基亚砜。请参阅相关的MSDS:www.quickzyme。。com/products/total-collagenassay。在2019年1月4日样品水解和使用试剂盒时,在总胶原蛋白分析期间佩戴眼睛、手、脸和衣物保护装置。在通风柜中进行分析。

临界参数

•此类分析可显示基质效应:样品中影响信号的干扰因素。通过稀释水解液可以避免这种影响。如果使用样品类型,应测试各种稀释液,直到获得A570与稀释液的线性。应用说明中给出了几种小鼠组织的建议稀释液(见我们网站上的产品页)。如果对于您的特定样品类型,为避免基质效应所需的稀释导致A570值非常低,我们建议使用

Quickzyme敏感组织胶原试剂盒。

•水解发生在95摄氏度(不高于!)20小时。螺丝帽

管子应该用手紧紧地关上。如果管不严密,水解液将蒸发。

•在分析的后一步中,在60℃下显色的培养时间为1小时。这是基于在烤箱中孵化。当在平板培养箱中进行培养时(培养箱和平板之间紧密接触),缩短的培养时间(20-30分钟)就足够了。

•当将分析缓冲液添加到35μl(稀释)水解液中时,会出现浑浊的外观,在一分钟内消失,不会影响分析。

•在低温下,分析缓冲液可能含有一些晶体。这些可以通过加热溶解。

在室温下,试剂A可能变成凝胶或固体,在37℃加热,涡旋将解决这个问题。

缓冲液/试剂制备

•分析缓冲液已准备好使用

•用于制备检测试剂混合物2体积的检测试剂A和3体积的检测试剂B。

检测试剂B和浓缩试剂A+B可能会腐蚀某些类型的塑料。对于这些溶液的移液,使用聚丙烯或聚乙烯移液管,或玻璃移液管。A+B溶液应在PP、PE或玻璃管中制成。不建议使用聚苯乙烯或PET。

试剂盒中提供的96孔板对分析中存在的稀释A+B溶液具有抗性。检测试剂B和A+B混合物具有腐蚀性,应小心处理。在通风柜中工作,使用适当的眼睛和面部保护,并戴手套。

样品制备(1)

-细胞提取物

将细胞提取物(50–250μl)转移到螺旋盖管中,并用12M HCl(终浓度6M HCl)以1:1(v/v)稀释。建议至少使用50μl样品和50μl 12M HCl。在放入烤箱之前,请将管子关紧。另请参见上面的关键参数。

-组织

a.组织匀浆

组织匀浆的处理与上述条件培养基和细胞提取物的处理类似。

b.组织样本

对组织样品(湿的或干的)进行称重,并将其转移到螺旋盖管中。所需的组织数量高度依赖于组织中的胶原蛋白水平。作为指示,根据组织的类型和数量,添加6M HCl以获得50-300 mg组织/ml。建议小体积为100μl。

样品制备(2)

管子必须非常紧密地闭合(从上面可以很清楚地看到橡胶圈),并在95℃下在校准的烤箱或热块中孵育20小时(不要在更高的温度下孵育)。孵育后,将试管冷却至室温。在达到室温之前不要打开管子。试管在eppendorf离心机中以13000 x g离心10分钟。上清液用于进一步分析。由于脂肪和碳水化合物的降解而产生的棕色或黑色颗粒可能存在,通过离心很难*去除。颗粒的数量取决于样品。转移上清液时尽量避免用移液管移取颗粒。除了挡住光路之外,这些微粒不会干扰分析。

首先用半水稀释水解样品:1体积样品+0.5体积水(例如200微升水解物+100微升水)。样品现在在4M HCl中。可能需要的所有进一步稀释(见“关键参数”中的备注)应使用4M HCl进行。试验中使用35μl稀释水解样品进行分析。

标准制备

胶原蛋白标准品以1200μg/ml的储备量在0.02m醋酸中提供。

对于标准线,将本标准的125μl转移到螺旋盖管中,并与等量(125μl)的12M HCl(6M HCl中的终浓度为600μg/ml)混合。管子非常紧密地闭合(橡胶圈应清晰可见),并在95摄氏度(不高于)下孵育20小时。在经过校准的烤箱或温度计中。孵育后,将试管冷却至室温,并在13000 x g的eppendorf离心机中离心10分钟。

上清液用于进一步分析。将8个Eppendorf管标记为S1-S8。s1至s7为水解料的稀释液,s8为空白。用水和4M HCl进行首轮稀释,以调整至4M HCl浓度。根据以下方案,在4M HCl中进行进一步稀释。结果得到如下标准线:300μg/ml(s1);200μg/ml(s2);100μg/ml(s3);50μg/ml(s4);25μg/ml(s5);12.5μg/ml(s6);6.25μg/ml(s7);0μg/ml(s8)。稀释后将所有标准品充分混合。每种标准品35μl用于分析

 

胶原蛋白标准线样品制备的移液方案

分析程序

建议对所有样品和标准品进行分析,一式两份

一。按照“样品制备”中的说明制备样品。

2.按照“标准制备”中的说明制备胶原蛋白标准品。

三。用移液管将35微升标准溶液移到分析微孔板的适当孔中。

四。用移液管将35μl稀释的水解未知样品(在4M HCl中)移到适当的孔中。

5个。每孔加入75μl试液,混匀。

6.用一个封闭的胶粘板封条盖住板,在室温下孵育20分钟,同时摇动板。

7。通过检测试剂A和B2:3(RESP 30μL+45 L L/阱)混合,制备一套足以检测待测威尔斯(75μL/阱)的试剂。

8。小心地拆下板密封件

9。每口井加入75μl检测试剂。

10。用封闭的粘合板密封件盖住板。

11。摇动盘子使之充分混合。在60°C的烘箱中培养60分钟(不要使用更高或更低的温度)。

12。把盘子放在冰上冷却5分钟至室温

13。混合板并小心地拆下板密封件

14。清洁板底部,在570 nm(可接受540-580 nm)下读取板并进行数据分析。

 

数据分析

有几种方法可用于计算分析样品中的胶原蛋白浓度。建议使用回归曲线拟合程序的软件包处理数据。如果不可用,可以手动计算胶原蛋白浓度,如下所示。

-平均每个标准品或样品的重复读数,并从所有读数中减去平均空白。

-通过绘制Y轴上的每个标准的A570(减去空白)与XXAX(0 – 3.13 – 6.25 – 12.5 – 25 – 50 – 100 – 200 – 300μg胶原蛋白/ml水解物)上的胶原含量的标准曲线。通过图形上的点绘制宜拟合线性化曲线。使用此标准曲线将试验样品的A570值转换为μg/ml胶原。这就得到了水解样品中的胶原蛋白浓度。如果水解后包括稀释步骤,则浓度应乘以2019年1月8日的稀释总胶原蛋白含量因子,得出水解样品中的胶原蛋白浓度。根据样品制备,可以计算原始样品中的胶原蛋白量。

典型数据

所示数据曲线仅供演示。准确的a570值在每个实验中可能略有不同。

典型的胶原蛋白标准曲线

 

相关产品:

-Soluble collagen assay 

– Hydroxyproline assay

– Human and mouse MMP-9 activity assay

– Human and mouse MMP-2 activity assay

 

 

 

鱼组织中的胶原蛋白分析

用总胶原蛋白分析法分析鱼组织中的胶原蛋白

QuickZyme总胶原测定提供了种简单快速的测定生物样品中胶原数量的方法。本应用说明为该检测方法在鱼类组织中的应用提供了指导,并显示了与HPLC的比较。
介绍
胶原蛋白是脊椎动物体内丰富的蛋白质。在鱼类(鱼)中,胶原蛋白含量约占总蛋白的3%,明显低于哺乳动物(17%)。
1
胶原蛋白的含量负责鱼片的完整性和质地。
鱼类组织中羟基脯氨酸的含量与生境有关。生活在温水中的鱼类胶原体的羟脯氨酸水平高于冷水物种,而哺乳动
物中的羟脯氨酸水平甚至更高。这些羟脯氨酸水平与该物种胶原蛋白的熔化温度相关。
2
鱼胶原越来越多地用于取 代传统的动物胶原来制备食品、化妆品或药用明胶。鱼胶原蛋白没有宗教反对,也没有与疯牛病相关的问题。
鱼类组织中胶原蛋白的准确分析对于食用鱼类的质量控制和优化鱼类养殖条件都具有重要意义。虽然胶原蛋白
是鱼类组织中的主要成分,但它是种难以纯化和定量的分子。这部分是由于胶原分子通过不同类型的交联形
成广泛的网络,使得胶原分子不溶性,难以提取。
市用胶原蛋白检测的数量和类型是有限的。
些可溶性胶原的分析存在,基于胶原分子沉淀染料天狼星红。然而,这些分析方法似乎不太适用于组织中的胶原蛋白的分析。
广泛使用的胶原蛋白测定方法是基于胶原蛋白水解为游离氨基酸,然后使用HPLC或比色法测定胶原蛋白特异性
羟脯安酸。然而,这些分析方法是费力的,耗时的,并需要特殊的设备。为了克服这些缺点,我们最近开发了
QuickZyme总胶原蛋白检测法,基于相同的酸水解和比色检测原理,但更快,更容易,不需要特殊设备。
在这个应用说明中,我们展示了该检测方法的优化,使其用于测量鱼类组织中的胶原蛋白的能力。

图1。总胶原蛋白比色法测定原理

方法
冷冻罗非鱼鱼片在当地超市获得,储存在20ºC。在使用前,立即将鱼片解冻,并在快速酶总胶原检测试剂盒提
供的水解管中称重约300毫克的组织片。
每300mg组织中加入1.0ml6M盐酸,并将试管牢固闭合。然后,组织在95ºC的温度控制的热块中水解过夜。水解物
变得非常暗,并含有小的黑色颗粒。冷却至室温后,将水解管在13000xg下离心10min。部分颗粒不能沉淀出来。
小心地取出部分上清液,尽可能避免转移颗粒。在4M盐酸中连续稀释水解物,稀释2256倍。35微升的几种水
解液稀释液的样品根据说明书进行总胶原蛋白测定。
根据Bank等人的研究,我们也用HPLC方法对水解物进行了分析。
3
结果
水解鱼组织的稀释曲线在低稀释时呈高度非线性,仅在16倍或以上的稀释中发现与稀释的反应呈线性关系(图2)
。这表明,水解物中含有在高浓度下干扰羟脯氨酸着色反应的物质。这种干扰在样品相当稀释时消失。为了研究
测定的回收率,在不同的水解物稀释液中加入固定数量的羟脯氨酸。低稀释(稀释2倍时10%)时羟脯氨酸的回收
率很差,但稀释16倍或以上的溶液与稀释呈线性关系。这与鱼的水解物的结果非常致。羟脯氨酸在稀释16倍或
更高时的回收率约为120%。


图2鱼水解物稀释对总胶原蛋白测定反应的影响。蓝线:鱼水 解物,红线:鱼水解物中加入150µM羟脯氨酸(Hyp)。上面板2 至256倍稀释,下面板16至256倍稀释。从16倍稀释向下观察到 与稀释呈线性关系

快速酶总胶原蛋白检测与HPLC的比较
根据Bank等人的方法,也用HPLC分析了用于比色总胶原蛋白法测定的相同水解物
4.
简而言之:水解物通过在快速 mac真空离心机中蒸发盐酸来干燥。样品中的氨基酸用OPA衍生,去除过量的OPA,用FMOC衍生亚胺酸(Pro和Hyp), 并在HPLC反相柱上进行多次稀释。通过比较羟脯氨酸峰面积与以同样的方法水解和衍生化的标准胶原蛋白制剂的 峰面积来确定胶原蛋白的含量。结果以每克湿罗非鱼组织的毫克胶原蛋白表达。
同样使用HPLC方法,低稀释的反应是非线性稀释。在充分稀释后,可以观察到与稀释有关的线性响应。这些稀释
液用于测定鱼组织中的胶原蛋白。
用快速酶总胶原检测发现每g湿罗非鱼组织4.5mg胶原,与HPLC法发现的每g湿组织5.1mg胶原很致。
结论
鱼水解物含有干扰快速酶总胶原蛋白测定的因素,因为这是个强非线性的 在低稀释因子下观察到与稀释度的关系,无论是对鱼的水解物本身和添加的羟脯氨酸。 当稀释16倍或更多时,鱼类的反应与稀释度呈线性关系 水解物和加入羟脯氨酸 水解物和羟脯氨酸的平行线指向良好的回收率和相似 这两个样本的行为。 同样,HPLC方法在低时观察到响应和稀释之间的非线性关系 稀释后,至少需要稀释64倍。 建议在试点试验中确定个特定物种的最佳稀释度。数据 这里可以作为设计试点的指导。 快速酶总胶原分析非常适合于鱼类组织中的胶原分析使用稀释水解物。结果与标准的HPLC方法具有良好的可比性。

One 96 well plate kit   .
Two 96 well plate kits  .
Five plate bulk kit         .
€   352     .
€   665     .
€ 1317   .
QZBtotcol1 
QZBtotcol2
QZBtotcol5 

 

Quickzyme QZBhypro2说明书

Quickzyme QZBhypro2说明书

Hydroxyproline Assay Kit

羟脯氨酸检测试剂盒

用于分析胶原蛋白和羟脯氨酸

QuickZyme羟脯氨酸测定用于定量测定羟脯氨酸。羟脯氨酸由胶原的(酸)水解产生。通常对于水解时的分析需要除去HCl,这是耗时的步骤和/或需要特殊设备。QuickZyme羟脯氨酸检测试剂盒是仅有一种不需要这一费力步骤的羟脯氨酸检测试剂,可快速(<2小时),灵敏且容易(96孔板形式)检测。

羟脯氨酸检测规格

  • 羟脯氨酸的定量测量。
  • 样品:酸水解的组织培养上清液,细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色测量
  • 范围:6至300μM。灵敏度:2.4μM(0.3μg/ ml)
  • 使用羟脯氨酸作为标准
  • 易于使用:相当于ELISA
  • 在室温下储存
  • 该试剂盒不含有试管和胶原蛋白水解方案。如果您需要这些物品,请订购QuickZyme总胶原蛋白测定

One 96 well plate kit  .
Two 96 well plate kits .
Five plate bulk kit .

€   304    .
€   573   .
€ 1159   .

QZBhypro1
QZBhypro2
QZBhypro5 

Quickzyme QZBtotcol2说明书

Quickzyme QZBtotcol2说明书

Total Collagen Assay

Total Collagen测定试剂盒基于通过胶原酸水解获得的羟脯氨酸残基的定量比色测定。通常对于该分析在水解时需要除去HCl,这是耗时的步骤和/或需要特殊设备。QuickZyme Total Collagen测定是仅有的一种不需要这个费力步骤的基于羟脯氨酸的测定,导致在水解步骤后快速(<2小时)和容易(96孔板形式)测定。

  总胶原蛋白测定规格

  • 定量测量所有类型的胶原蛋白,物种独立。
  • 样品:组织培养上清液,细胞提取物,组织匀浆,组织。
  • 比色测定羟脯氨酸含量
  • 范围:6至300μg/ ml。灵敏度:2.5μg/ ml
  • 使用鼠尾胶原作为标准
  • 易于使用:相当于ELISA
  • 在室温下储存
  •  

One 96 well plate kit   .
Two 96 well plate kits  .
Five plate bulk kit         .

€   316     .
€   597     .
€ 1182   

QZBtotcol1 
QZBtotcol2 
QZBtotcol5

各种类型和各种形式胶原蛋白的定量测定

·物种独立

·在570 nm处进行比色读出

·快速和容易

·大动态范围

基于羟脯氨酸的分析

·与提取方法无关

不需要特殊设备!

化验规格

动态范围:6-300微克/毫升

灵敏度:2.5微克/毫升

样本量:50-500升

格式:96井板

预期用途:非常广泛

应用:条件培养基细胞/细胞提取物、组织/组织提取物、种类独立的胶原类型无关。

 

定量测量,数量测量

 

测定原理

 

这盒子里是什么?

 

标准,缓冲器和板包括在内。水解管,微效价板,胶原标准,缓冲液,检测试剂,板封。不包括HCL。

 

相关分析

 

可溶性胶原试验

 

-羟脯氨酸测定

 

-人和小鼠MMP-9活性测定

 

-人和小鼠MMP-2活性测