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worthington LS004200​说明书

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worthington LS004200说明书

来源：溶组织梭菌

IUB：3.4.24.3

胶原酶原料认证

粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种同工型，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨肽酶。这种胶原蛋白水解和蛋白水解活性的组合可有效分解细胞间基质，这是组织解离的重要部分。该复合物的一个成分是水解酶，它优先在序列 Pro-Y-Gly-Pro 中的 Y-Gly 键处降解天然胶原蛋白中的螺旋区域，其中 Y 最常见的是中性氨基酸。这种切割产生对进一步肽酶消化敏感的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA 或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制，但 DFP 不抑制。它也被一种大的血浆糖蛋白α2-巨球蛋白抑制。钙2+是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱已与获得研究细胞的组织相关（或与放置细胞的用途相关），并且作为相关性的结果，Worthington 已经建立了几种类型的粗胶原酶：类型 1、2、3 和 4。

• 1 型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2 型含有较高相对水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。
• 3 型含有低水平的二级蛋白酶。
• 4 型被设计成胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损害。
• 5 型 含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。
• 6 型 含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例约为 2:1。设计为相对于 I 型 ( col  G)富含 II 型 ( col  H) 胶原酶。
• 7 型胶原酶和酪蛋白酶的活性比 1 型和 2 型胶原酶高四倍。

•纯化的胶原酶，代码：CLSPA，含有最少的二次蛋白水解活性和高胶原酶活性。

新的！ 无动物型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2胶原酶来源于在*不含动物成分的培养基中生长的培养物，设计用于必须防止引入潜在动物源性病原体的生物加工应用。二级蛋白酶的水平与 1 型和 2 型胶原酶相似。

•  CLSAFA 是最初的 AFA 等级，旨在含有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和二级蛋白酶。
•  CLSAFB 含有比 CLSAFA 更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
•  CLSAFC 具有特别低的胰蛋白酶活性，类似于 4 型胶原酶。
•  STZ1 和 STZ2，0.22μ 过滤的 STEMxyme ® AOF 胶原酶/中性蛋白酶 (Dispase®) 混合物，用于原代细胞和干细胞分离。

Worthington 还提供预包装形式的每种类型的 0.22µm 过滤制剂，用于直接重组和用于细胞分离和培养程序。酶类型和不同组织的有效性之间的相关性很好，部分原因是使用的可变参数。然而，大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。Worthington 胶原酶和污染物检测的详细说明可在Worthington 酶手册中找到。此外，组织特异性参考和详细的分离条件可以在Worthington 组织分离指南中找到。

胶原酶测定是Mandl的改进，其中将胶原酶与天然胶原一起温育5小时，并使用Moore and Stein, JBC, 176 , 367, (1948)比色茚三酮法测定胶原分解的程度。释放的氨基酸以每毫克胶原酶微摩尔亮氨酸表示。

用途：粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织解离程序。大多数研究人员要么使用粗制胶原酶制剂，例如 1、2、3 和 4 型，要么使用色谱纯化的胶原酶（代码：CLSPA）；后者通常与二级酶如弹性蛋白酶、透明质酸酶等结合。为了获得最佳结果，必须针对要解离的组织调整蛋白水解活性的精确混合。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好，并且可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。如需更多信息，请参阅胶原酶取样程序信息。Worthington 还出版了组织分离指南它提供了有关用于这些应用的酶的更多信息以及多种细胞和组织类型的具体参考。

单位定义：一个单位在 37°C、pH 7.5 下 5 小时内从胶原蛋白中释放 1 微摩尔 L-亮氨酸当量

相关产品：

胶原蛋白 (CL)
脱氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
弹性蛋白酶 (ES/ESL/ESFF)
透明质酸酶 (HSE/HSEP)
中性蛋白酶 (Dispase, NPRO)
木瓜蛋白酶 (PAP/PAPL/PAP2)蛋白酶 K (PROK)
胰蛋白酶 (TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)
胰蛋白酶抑制剂 (LBI/OI/SI/SIC)

细胞分离优化系统 (CIT)
肝细胞分离系统 (HIS)
新生儿心肌细胞分离系统 (NCIS)
木瓜蛋白酶解离系统 (PDS/PDS2)

胶原酶，1 型
酶活性的原始平衡。每个批次都检测胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。建议用于上皮细胞、肝细胞、肺细胞和肾上腺原代细胞分离。一种透析的冻干粉末。
储存在 2-8°C。		 ≥125 单位/毫克干重 CLS-1 100 毫克 LS004194
块 LS004193
1克 LS004196
5克 LS004197
块 LS004200

 

 

worthington 胶原酶现货说明书

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上海金畔worthington 胶原酶现货说明书

Collagenase

粗胶原酶制剂含有两种不同的胶原酶的几种亚型，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨基肽酶。这种胶原分解和蛋白分解活性的结合有效地分解细胞间基质，细胞间基质是组织分解的重要部分。复合物的一种成分是一种水解酶，它优先降解天然胶原中的螺旋区，位于Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly键，其中Y最常见的是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步消化肽酶的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制，但不被DFP抑制。α2-巨球蛋白（一种大的血浆糖蛋白）也对其有抑制作用。酶活性需要Ca2+。每种胶原酶的特定酶谱都与获得研究细胞的组织（或细胞的用途）相关，因此Worthington建立了几种类型的粗胶原酶：1型、2型、3型和4型。

•1型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。

•2型含有较高相对水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

•类型3含有低水平的次级蛋白酶。

•类型4的胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损害。

•5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。

•6型含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1。与I型（col G）相比，设计用于II型（colH）胶原酶的富集。

•7型胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型胶原酶高4倍。

•纯化的胶原酶，代码：CLSPA，含有低的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。

新无动物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2胶原酶来源于不含动物成分的培养基中生长的培养物，设计用于必须防止引入潜在动物源病原体的生物加工应用。次级蛋白酶的水平类似于1型和2型胶原酶。

•CLSAFA是最初的AFA等级，旨在具有与1型和2型胶原酶相似的胶原酶和次级蛋白酶。

•CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。

•CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性，类似于4型胶原酶。

•STZ1和STZ2，0.22μ过滤STEMxyme®AOF胶原酶/中性蛋白酶（Dispase®）混合物，用于原代和干细胞分离。

沃辛顿还提供预包装形式的每种0.22µm过滤制剂，用于直接重组和用于细胞分离和培养程序。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性很好，部分原因是使用参数的变化。然而，大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。沃辛顿胶原酶和污染物分析的详细描述可在沃辛顿酶手册中找到。此外，组织特异性参考和详细的分离条件可在沃辛顿组织分离指南中找到。

胶原酶测定是Mandl的改进，其中胶原酶与天然胶原孵育5小时，并使用Moore和Stein，JBC，176367，（1948）比色茚三酮法测定胶原分解程度。释放的氨基酸表示为每毫克胶原酶微摩尔亮氨酸。

用途：粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织分离过程。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，如1型、2型、3型和4型，或色谱纯化的胶原酶（代码：CLSPA）；后者通常与二级酶（如弹性蛋白酶、透明质酸酶等）结合。为了获得最佳结果，蛋白水解活性的精确混合物必须适合待分离的组织。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好，可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。有关更多信息，请参阅胶原酶采样程序信息。沃辛顿还出版了《组织解离指南》，该指南提供了用于这些应用的酶的额外信息，以及多种细胞和组织类型的特定参考。

相关产品：

胶原蛋白（CL）

脱氧核糖核酸酶I（DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF）

弹性蛋白酶（ESL/ESL/ESFF）

透明质酸酶（HSE/HSEP）

中性蛋白酶（Dispase，NPRO）

木瓜蛋白酶（PAP/PAPL/PAP2）蛋白酶K（PROK）

胰蛋白酶（TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK）

胰蛋白酶抑制剂（LBI/OI/SI/SIC）

细胞分离Optimizi

描述：

STEMxyme®1，胶原酶/中性蛋白酶（Dispase）

来源：溶组织梭菌/多粘菌芽孢杆菌

无动物溶组织梭菌胶原酶（代码：CLSAFB）和无动物多粘菌中性蛋白酶的特殊组合，每毫克干重至少含有250 CLS单位和1000酪蛋白酶单位。设计用于干细胞和其他原代细胞分离和生物处理应用，必须防止引入潜在的动物源性病原体。

储存于2-8°C。

≥250 CLS/1,000 CAS units per milligram dry weight

货号：LS004106

worthington LS004106

Collagenase V胶原酶V型说明书

发表于由

Collagenase V胶原酶V型说明书

 

产品详情

货号

规格

价格

LS005280-100mg

100mg

￥630.00

LS005282-1g

1g

￥3,500.00

LS005283-5g

5g

￥14,900.00

 

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为V型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），具有更高的胶原酶活性和酪蛋白酶活性，更低的胰酶水平以降低对细胞膜蛋白的损伤，适用于胰腺小岛细胞和结缔组织细胞的分离。

酶活力单位定义

      在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

    1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase I 胶原酶I型说明书

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Collagenase I 胶原酶I型说明书

 

产品详情

货号

规格

价格

LS004194-100mg

100mg

￥520.00

LS004196-1g

1g

￥3,000.00

LS004197-5g

5g

￥13,500.00

 

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

      室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

 1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

  2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase IV胶原酶IV型说明书

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Collagenase IV胶原酶IV型说明书

 

产品详情

货号

规格

价格

LS004186-100mg

100mg

￥520.00

LS004188-1g

1g

￥3,000.00

LS004189-5g

5g

￥13,500.00

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为IV型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），特别适用于胰岛组织的消化。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

       1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase III 胶原酶III型说明书

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Collagenase III 胶原酶III型说明书

产品详情

货号

规格

价格

LS004180-100mg

100mg

520

LS004182-1g

1g

3000

LS004183-5g

5g

13500

 

 

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

    1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途

Collagenase II 胶原酶II型说明书

发表于由

Collagenase II 胶原酶II型说明书

 


产品详情

货号

规格

价格

LS004174-100mg

100mg

520

LS004176-1g

1g

3000

LS004177-5g

5g

13500

LS004177-15g

15g

询价

 

 

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为II型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未全部解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

        1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase I 胶原酶I型 说明书

发表于由

Collagenase I 胶原酶I型 说明书

产品货号

货号

规格

价格

LS004194-100mg

100mg

￥520.00

LS004196-1g

1g

￥3,000.00

LS004197-5g

5g

￥13,500.00

 

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是wei一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

      室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未wan全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3． 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

 1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

  2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

 


Serva-胶原酶、电泳试剂、生化试剂供应商

发表于由

德国Serva公司于1953年在德国海德堡（德国生命科学的中心）成立，拥有60年的优质试剂供应经验，在全球范围内生产销售胶原酶、电泳试剂、生化试剂等优质试剂。Serva在产品质量等方面追求最高标准，致力于确保产品性能的一致性和供应的连续性，并通过了ISO 9001:2015认证。Serva的使命是将创新产品推向生命科学市场，不断改进技术能力和全面质量管理，满足客户的需求。

Serva的发展历程：

1953年，Serva由化学家Nikolaus Grubhofer博士在海德堡创建。他的想法是向学术界和工业界的研究实验室提供精细的生物化学试剂，以“服务于科学”（SERVA=lat. servare）。

1961年，Serva第一个产品目录列出了大约450种产品。在20世纪70年代，Serva以其全面的精细生物化学试剂而闻名，为世界各地的实验室提供试剂。生物分子分离（生物分离）技术的发展开创了SERVA的新阶段—专有产品开发。随后，一系列用于电泳和色谱的试剂在20世纪70年代和80年代被推向市场。

1986年，Serva将所有权变更为勃林格殷格翰制药公司（Boehringer Ingelheim Pharma Corporation），为建立“生物业务”做出了贡献。作为美国各种关键产品线的分销合作伙伴，Serva成功满足了日益增长的生命科学研究市场的即时需求。

1998年，勃林格殷格翰制药公司（Boehringer Ingelheim Pharma Corporation）最终决定将Serva出售给总部位于美国的Novex公司，Novex公司是电泳的主要供应商。

1999年Novex公司被美国Invitrogen公司收购。SERVA在2002年之前一直是Invitrogn集团的一部分。

2002年7月，Serva电泳有限公司现在再次独立，wan全由德国股东所有。总部设在海德堡，继续通过全球分销网络提供优质产品。

未来，SERVA将进一步发展的现有技术，成为生命科学市场的领xian者，专注于某一些领域。SERVA的使命是通过合作和战略联盟，提供源自SERVA自身专业知识的创新产品。

主要产品线

一、样品制备相关产品（蛋白制备、核酸制备及定量）

在蛋白质和核酸分析的实验中，可靠、高效和简单的样品制备是实现最佳和可重复结果的关键步骤之一。Serva提供裂解缓冲液、酶、洗涤剂、蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂、缓冲液、盐等试剂，以及蛋白质提取试剂盒、亲和层析树脂、超滤浓缩器、内毒素去除或清洁剂试剂盒、蛋白定量试剂盒等产品。

 

二、质谱相关试剂

Serva提供内切蛋白酶、糖苷酶、溶剂、稳定同位素标记等。

三、电泳相关产品

包括核酸电泳、SDS-PAGE、western blot、凝胶制备试剂等。

 

四、胶原酶和中性蛋白酶

中性蛋白酶是由多肉芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）产生的一种细菌酶，水解非极性氨基酸残基的N端肽键，属于氨基内肽酶。中性蛋白酶只能破坏细胞外基质而不破坏细胞之间的连接，因此主要用于细胞集落的分离和将组织块分解成小块细胞，因为它保持细胞膜的完整性，其温和的蛋白水解作用使酶可以被特异性用于分离原代细胞和次级细胞（亚培养）。中性蛋白酶也常被用作与胶原酶和/或其他蛋白酶结合的次级酶，用于许多原代细胞的分离和组织解离。中性蛋白酶可以破坏细胞表面的分子或者抗原，例如与T细胞分析相关的抗原。因此，如果发现细胞某些表位蛋白的丢失，可以从消化液中将该酶去掉。胶原酶在众多蛋白酶中是du一无二的，它能够攻击和降解结缔组织中常见的三螺旋天然胶原纤维。胶原酶破坏胶原蛋白中存在的肽键，有助于消化细胞外基质，使细胞释放到悬浮液中。

Serva明星产品

品牌

产品名称

货号

规格

Serva

SERVALYT™ 2-9 Seed-Mix

4293502

25 mL

Serva

IEF Marker 3-10, Liquid Mix

3921201

500 μL

Serva

SERVALYT™ 3-10

42940.01

10 mL

Serva

β-Propiolactone

33672-100ML

100 mL

Serva

Collagen R solution 0.2 ％

4725401

20 mL

Serva

SERVALYT ™ 2-9 Seed-Mix

42935.01

10 mL

Serva

Yeast Extract ServabacterR powder

2454003

5 kg

Serva

β-Propiolactoneresearch grade

33672

100 mL

Serva

SERVALYT™ 3-7

4294501

10 mL

Serva

SERVALYT(TM) 2-9 Seed-Mix

4293501

10 mL

Serva

SERVALYT™ 2-11

4290001

10 mL

Serva

SERVALYT™ PRECOTES™ Wide Range pH 3-10

4286602

5 gels

Serva

SERVALYT™ 2-11

4290001

10 mL

Serva

SERVALYTTM 3-10 40％ (w/v)

4294002

25 mL

Serva

Polyvinylsulfate-K-salt

3342502

10 g

Serva

Dodecylsulfate-Na-salt in pellets

2076503

1 kg

Serva

FocusGel 6-11 24S

4332901

5 gels

Serva

SERVALYT™ 7-9

4290701

10 mL

Serva

SERVALYT™ 8-10

4291101

10 mL

Serva

ERVALYT™ 6-7

4292501

10 mL

作为Serva在中国区域经销商，上海金畔生物科技有限公司将为中国客户提供全面的Serva的产品。

 

NADH二钠还原型辅酶IRoche

发表于由

产品型号

品       牌

产品简介

本公司各种实验室生化试剂大量备现货，欢迎广大新老客户订购

详情介绍

a-*1:3700 国产
果胶酶 Japan（50u/mg）
果胶酶Y-23 Japan
过氧化氢酶 SigmaC9322
黄嘌呤氧化酶 SigmaX1875
胶原酶I SigmaC0130
胶原酶II SigmaC6885
胶原酶IV SigmaC5138
辣根过氧化物酶（POD） SigmaP6782
 Roche
离析酶R-10 Japan
亮抑酶肽 AmrescoJ580
链酶蛋白酶E Roche
木瓜蛋白酶 Merk
NAD氧化型辅酶I Roche
NADH二钠还原型辅酶I Roche
NADP氧化型辅酶II Roche
NADPH还原型辅酶II Roche
* SigmaT4648
苹果酸脱氢酶 Amresco0373
PMSF Amresco0754
葡萄糖氧化酶 Sigma G7141
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 Roche
RNase A SigmaR4875
RNA酶抑制剂 N2111SV
* Amresco0663
溶壁酶 SigmaL4025
L-乳酸脱氢酶 Sigma L2500
糖化酶1:100000 国产
透明质酸酶 SigmaH3506
*1:3000 Amresco0685
*1:10000 SigmaP7000
*抑制剂 SigmaP4265
蜗牛酶 国产
纤维素酶 Japan