上海金畔现货progen PRAAV2R说明书
AAV2 Titration ELISA 2.0R
主要特征
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ELISA 定量 AAV2 衣壳
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检测完整和空的 AAV2 衣壳
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A20R抗体用作捕获和检测抗体
数量 |
96 项测试 |
反应性 |
AAV2 |
存储 |
2-8°C |
有可能的使用 |
仅供研究使用 |
应用 |
酶联免疫吸附试验 |
产品描述 |
*的微量滴定板酶免疫分析,用于对 AAV2 的病毒粒子和组装的空衣壳进行定量。重组捕获抗体检测未组装衣壳蛋白上不存在的构象表位。 |
详情 2 |
AAV2的空衣壳制备 |
提供表格 |
试剂盒,12 x 8 孔条 |
ELISA原理:
该测定基于夹心 ELISA 技术,其中对组装的 AAV 衣壳上的构象表位具有特异性的重组抗体包被到板上,用于从样本中捕获 AAV 颗粒。
捕获的 AAV 粒子的检测是一个两步过程。
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生物素偶联的重组抗体与捕获的 AAV 颗粒结合。
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链霉亲和素过氧化物酶偶联物与生物素分子反应。添加底物会导致颜色反应,该反应与特异性结合的病毒颗粒的量成正比。
AAV 量化方法的比较:
每种常用的量化方法都有其优缺点:
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qPCR被广泛使用,但存在一些问题,例如样品制备、引物设计或 PCR 效率,这些问题会导致实验室间结果的高度差异。
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数字液滴 PCR方法克服了 qPCR 的一些局限性。然而,由于不同的样品处理协议,实验室之间的差异仍然可能发生。
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如果使用可靠的参考材料,斑点印迹是一种简单且定量的方法。然而,它通常受到蛋白质印迹的有限线性和动态范围的影响。
鉴于上述技术的实际缺点,传统的夹心 ELISA 目前在实验室间和实验室内的变化以及易用性方面似乎更胜。因此,它代表了可靠和可重复量化总 rAVV 衣壳滴度的最佳格式。
使用 shuffled/mutated AAV:
改组/突变 AAV 载体的识别取决于受改组/突变影响的特定衣壳区域。用于 PROGEN 的 AAV ELISA 的捕获抗体结合特定的,在某些情况下,结合明确的构象表位。这些表位由相应 AAV 血清型的衣壳组装产生。ELISA 可能识别您的改组/突变 AAV 载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而,衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象,因此 AAV 衣壳上呈现的表位的构象。这可能会影响抗体的结合亲和力,并影响基于 AAV ELISA 试剂盒提供的(非改组)试剂盒对照的滴度确定。由于这些属性在很大程度上取决于执行的特定改组/突变,因此 PROGEN 无法保证对改组/突变的 AAV 载体进行成功和精确的量化。即使抗体结合表位仍然存在于您改组/突变的 AAV 衣壳上,您的检测也需要针对您的特定 AAV 载体进行测试和优化。
PROGEN 强烈建议生产和校准合适的(改组/突变)试剂盒对照,以确保使用 PROGEN ELISA 试剂盒对您单独改组/突变的 AAV 载体进行可靠的滴度测定。
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