LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒 LBIS® Rat GH ELISA Kit

LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒
LBIS® Rat GH ELISA Kit

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LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒                              LBIS® Rat GH ELISA Kit

大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒



  生长激素(Growth hormone,别名Somatotrophic hormone、 STH、 Somatotrop(h)in)主要是由垂体前叶嗜酸性腺垂体分泌的蛋白激素,在大脑和淋巴细胞表达。与GH高度相似的GH2表达于人的胎盘。GH作用于肝脏肌肉肾脏软骨细胞成纤维细胞胸腺上皮细胞。在IGF-1作用下,通过软骨细胞的增殖、硫酸软骨素的合成、肝脏其他器官细胞肥大增殖、促蛋白合成等促进生长,对胸腺细胞分泌胸腺素起到促进作用。GH暂时性表达胰岛素样作用,之后在脂肪细胞中通过脂肪分解增加游离脂肪酸、血糖上升、胰岛素拮抗作用抑制糖分解、肌肉中糖原含量增加、末梢组织胰岛素灵敏性下降等代谢方面起到一定双相性作用。还起到类似催乳素作用对Na、K、Mg、Ca、P的存积促进小肠Ca吸收乳腺发育乳汁分泌等作用。

GHRH生长素释放肽甲状腺激素皮质醇视黄酸均可促进GH合成分泌。另外通过胰高血糖素加压素2-脱氧-D-葡萄糖耐受性精氨酸等酸负载蛋白质摄入TF5β-内啡肽左旋多巴肾上腺素α受体刺激等可促进GH分泌。促进GH分泌的生理状态是低血糖应激(发热,外伤,出血,乙醚麻醉,精神焦虑)空腹运动慢波睡眠等。GH分泌会抑制引起促生长素抑制素(SRIF)活化素肾上腺素β受体刺激葡萄糖游离脂肪酸皮质类固醇投放高浓度IGF-1高浓度GH等现象发生。抑制GH分泌的生理状态是高血糖增加血液中的脂肪异相睡眠等。GH分泌是具有episodic性的。也就是说可间隔性地使血糖浓度急剧上升或下降。因此非人为采血时血中GH水平会变化很大。

◆特点

LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒                              LBIS® Rat GH ELISA Kit

● 测定时间短(总反应时间:5小时)

● 微量样本(标准操作法5 μL)即可测定。

● 使用无害的防腐剂。

● 全部试剂为溶液即用类型。

● 高测定精度和高重复性。

 

试剂盒组成


组成品

状态

包装

抗体包被96孔板

清洗后使用

96 wells(8×12)/1个

标准溶液(20 ng/mL)

稀释后使用

100 μL/1瓶

缓冲液

直接使用

60 mL/1瓶

生物素结合抗GH抗体

稀释后使用

100 μL/1瓶

过氧化物酶·抗生素结合物

稀释后使用

100 μL/1瓶

显色液(TMB)

直接使用

12 mL/1瓶

终止液(1M H2SO4

※小心轻放

直接使用

12 mL/1瓶

浓缩清洗液(10×)

稀释后使用

100 mL/1瓶

孔板密封膜

4个

产品说明书

1本

 


物种交叉性


2000 pg/mL时数据+:有交叉性   ―:无交叉性


动物种类

对象物质

反应性及反应率(%)

大鼠

r-GH

100

Prolactin

0.02

Placental   lactogen

0.02

TSH

LH

FSH

小鼠

GH

TSH

 


◆样本信息


● 大鼠血清·血浆

● 5 μL/well(标准操作法)

※ 样本量可调节范围:5~25 μL。但需用缓冲液将板孔总量调制至50 μL

※ 推荐使用1 mg/mL (终浓度)EDTA作为抗凝剂。

 


◆测定范围


● 31.3~2,000 pg/mL(标准曲线范围)

● 62.6~4,000 pg/mL(样本量25 μL时)

● 0.313~20 ng/mL(标准操作时)

 


◆实验数据


精度测试(组内变异)


样本

A

B

1

262

864

2

247

837

3

250

813

4

258

775

5

251

780

6

257

800

7

254

771

8

270

779

Mean

256

802

SD

7.19

33.5

CV(%)

2.8

4.2

单位:pg/mL



重复性测试(组间变异)


测定日/样本

E

F

G

0天

1626

412

96.0

1天

1576

407

97.9

2天

1615

409

96.1

3天

1561

401

103

Mean

1595

407

98.3

SD

31.0

4.50

3.35

CV(%)

1.9

1.1

3.4

单位:pg/mL,n=4



加标回收测试


样本C


添加量

实测值

回收量

回收率(%)

0.00

101

155

265

164

106

192

285

184

95.8

223

325

224

100

单位:pg/mL,n=2


样本D


添加量

实测值

回收量

回收率(%)

0.00

506

303

822

316

104

466

949

443

95.1

539

1058

552

102

单位:pg/mL,n=2



稀释直线性测试


2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果,直线回归值R2=0.999。

参考文献

1.

Daily Fasting Blood Glucose Rhythm in Male Mice: A Role of the Circadian Clock in the Liver. Ando H, Ushijima K, Shimba S, Fujimura A. Endocrinology. 2016 Feb;157(2):463-9.


2.

Casted-immobilization downregulates glucocorticoid receptor expression in rat slow-twitch soleus muscle. Sato S., Suzuki H., Tsujimoto H., Shirato K., Tachiyashiki K., Imaizumia K. Life Sciences, Vol.89(25-26), p962-967, Dec 2011.


3.

Activation of PPARδ promotes mitochondrial energy metabolism and decreases basal insulin secretion in palmitate-treated β-cells. Jiang L., Wan J., Ke L., LU Q., Tong N. Molecular and Cellular Biochemistry, Vol.343(1-2), p249-256, Oct 2010.


4.

The CXCR4 antagonist AMD3100 suppresses hypoxia-mediated growth hormone production in GH3 rat pituitary adenoma cells. Yoshida,D.,Koketshu,K.,Nomura,R.,Teramoto,A. J Neurooncol, 2010.

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
639-13749 (AKRGH-010)LBIS® Rat GH ELISA Kit
LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒
96 tests

thenativeantigen CMV-PENT-50说明书

thenativeantigen CMV-PENT-50说明书

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物,由 gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A 蛋白组成,在哺乳动物 HEK293 细胞中产生,纯度高于 95%。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。


SKU:CMV-PENT-50 

类:抗原和抗体, CMV 抗原 

标签:巨细胞病毒 gH 五聚体


SDS-PAGE:考马斯染色的 SDS-PAGE,显示巨细胞病毒 gH 五聚体复合物。

直接ELISA:板用1000ng、100ng、10ng或1ng NRP-2包被并用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 进行探测,然后在室温下封闭 1 小时。在室温下,用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 对板进行探测 2 小时。对于一抗,绵羊抗 gH 五聚体血清以 1:2,000 使用,小鼠抗 His-tag 抗体以 1:1,200 使用(对于 ZIKV-NS1),gB 不使用一抗。二抗 STAR88P 用于 gH 五聚体,浓度为 1:2,000;STAR147P 用于通过 Fc-tag 以 1:2,000 检测 gB huFc-tag,Biorad 105300 用于以 1:2,000 检测 ZIKV-NS1。所有二次孵育均在室温下进行 45 分钟。使用 TMB 膜底物 (KPL) 进行检测 40 分钟。使用 1M HCl 终止反应。测定证实 NRP-2 与 gH 五聚体特异性结合,但不与 gB 或 ZIKV NS1 结合。



巨细胞病毒GH五聚体复合物

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物包含五种病毒蛋白(gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A)。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。

 

产品详情 – 巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

  • 重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物(菌株 VR1814),由蛋白 UL75 (gH)、UL115 (gL)、UL128、UL130 和 UL131A 组成。

  • gH 蛋白含有一个 C 末端的 His 标签,并在 HEK293 细胞中重组产生。

  • 在 Dulbecco 的 PBS 中呈现,0.2µm 过滤器已灭菌。

  • 在 ELISA 中纯化的蛋白质与 NRP-2 受体结合。

  • NCBI 登录代码:ACZ79986。

 

背景

hCMV 可导致免疫受损个体(如移植受者和 HIV 患者)的严重发病/死亡,而先天性 hCMV 感染可导致出生缺陷。

五聚体复合物在所有野生型 hCMV 毒株上均有表达,但在 AD169 等实验室毒株中明显缺失。弗里德等人)。这严重限制了疫苗的开发。受体介导的病毒进入内皮细胞需要功能性的 gH 五聚体复合物,而这种复合物是感染个体中抗病毒抗体的主要靶标之一。NAC 的新型重组 hCMV gH 复合物将是实现必要的基础和应用研究的关键。此外,gH 复合物有望为新一代体外诊断检测提供基础。

类似天然的五聚体复合物在人体细胞中产生,以确保所有蛋白质都正确折叠并具有其天然糖基化模式。通过质谱确认纯化复合物中所有五种蛋白质的存在。五聚体复合物以即用型液体形式提供,提供 100ug 和 1mg 小瓶大小,有机会批量购买。

NAC 在其 CMV 系列中提供另外两种抗原:一种天然高纯度抗原,对 IgG 和 IgM 均表现出高亲和力,是抗体捕获测定的理想选择,另一种更适合作为血清学对照的标准裂解物。

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物作为目录项目出售,仅用于研究用途和体外诊断测定/试剂盒,因此无需事先与 NAC 达成协议。如果产品旨在用作药物或作为生产药物的手段(包括用作免疫原和用于临床试验),则必须事先与 NAC 签订合同协议。

 

参考

  • 弗里德等人。(2013)。Proc Natl Acad Sci 美国 A.110(51)。