ES/iPS细胞未分化维持研究用小分子化合物
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ES/iPS细胞未分化维持研究用低分子化合物
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标签归档：ips
ES/iPS细胞分化诱导研究用小分子化合物
ES/iPS细胞分化诱导研究用小分子化合物
- 产品特性
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ES/iPS细胞分化诱导研究用低分子化合物
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rBC2LCN 人ES/iPS细胞 未分化标记
rBC2LCN 人ES/iPS细胞 未分化标记
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rBC2LCN 人ES/iPS细胞 未分化标记
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ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
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ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
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iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)） 新型人iPS/ES细胞标记抗体
iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)）
新型人iPS/ES细胞标记抗体
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新型人iPS/ES细胞标记抗体
iPSelector<Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)>
iPSelector是一款使用人iPS细胞作为免疫原制备的，可识别lacto-N-fucopentaoseⅠ（LNFPⅠ）的抗体。LNFPⅠ是存在于未分化的人ES细胞、人iPS细胞表面的糖链，由于细胞分化后不再表达LNFPⅠ，因此iPSelector可作为未分化iPS/ES细胞的标记物使用。
另外，由于该产品与未分化人iPS/ES细胞结合会发挥细胞伤害作用，因此亦可用于去除未分化iPS/ES细胞。
※ 本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。
※ 本产品基于立命馆大学 综合科学技术研究机构与药学部及（独）医药基础、健康、营养研究所的共同研究成果
※ 商品化而成。
◆关于人iPS/ES细胞标记抗体
迄今为止，iPS/ES细胞标记抗体（TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等）被广泛用于确认人iPS/ES细胞的未分化状态。然而，这些抗体大部分都是使用胚胎癌细胞（embryonal carcinoma细胞：EC细胞）作为免疫原开发的抗体，与EC细胞交叉性很强。而且，如TRA（tumor rejecton antigen）的名字所示，TRA抗体能够与多种癌细胞反应。综上所述，TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等并不能称为iPS/ES的特异性抗体。
iPSelector <Anti-LNFP I, Human, Mouse-Mono(R-17F)>来源于人iPS细胞作为免疫原制备的杂交瘤细胞，从中筛选出满足人iPS细胞阳性、人EC细胞阴性条件的单克隆抗体。由于本产品几乎不与EC细胞交叉反应，能够高选择性、特异性地识别未分化人iPS/ES细胞，因此可以用作新型人iPS/ES细胞标记抗体。
◆特点
● 特异性识别未分化人iPS/ES细胞的小鼠单克隆抗体（亚型：IgG1，克隆号：R-17F）
● 可用作识别人iPS/ES细胞的标记抗体。
● 即使是人iPS/ES细胞集落的内部，也能够均匀地染色所有人iPS / ES细胞的细胞膜。
● 与未分化人iPS/ES细胞结合时会发挥细胞伤害作用，可用于去除未分化iPS/ES细胞。
■ 比较iPSelector与现有标记抗体的细胞结合性
不同于目前常用的人多能干细胞标记抗体TRA-1-60，TRA-1-81等，iPSelector虽然与iPS细胞（Tic）以及ES细胞（KhES-3，H9）结合良好，但基本不与EC（2102Ep，NCR-G3）细胞结合。
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细胞 |
本产品 |
TRA-1-60 |
TRA-1-81 |
SSEA-3 |
SSEA-4 |
SSEA-1* |
Nanog |
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表位 |
糖脂质 |
硫酸角质素 |
硫酸角质素 |
球蛋白 |
球蛋白 |
LeX |
转录因子 |
|
Tic (iPS) |
++++ |
++++ |
++++ |
++++ |
++++ |
+ |
+++ |
|
KhES-3 (ES) |
+++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
+ |
+++ |
|
H9 (ES) |
++++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
+/- |
+++ |
|
2102Ep (EC) |
+/- |
++++ |
++++ |
+++ |
+++ |
+ |
+++ |
|
NCR-G3 (EC) |
++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
++ |
++++ |
*SSEA-1小鼠ES/iPS标记抗体
◆应用实例
■ 蛋白印迹
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进行5 μg细胞裂解液的蛋白印迹。 左：人iPS细胞（LNFPⅠ表达） 右：HEK293细胞（LNFPⅠ不表达） 稀释度：2,000倍（0.5 μg/mL） 二抗：Anti-Mouse IgG, Goat-Poly, HRP（KPL公司 #5220-0337） 化学发光底物：Trident plus Western HRP Substrate（GNT公司 #GTX400006） 检测：使用LuminoGraph I (ATTO)在1 min内检测
由于LNFPⅠ为糖链，可在蛋白印迹中观察到多条条带。这些条带都为未分化人iPS特异性条带，而在HEK293细胞中未检测出。 |
■ 免疫细胞染色
使用iPSelector和现存的标记抗体，染色人iPS细胞集落。在SSEA-3抗体和SSEA-4抗体中，无法染色所有人iPS细胞，但iPSelector可以均匀染色细胞集落中包含的所有人iPS细胞的细胞膜。
■ 流式细胞仪
将iPSelector用于流式细胞仪。
由图可知，阴性对照无法识别未分化人iPS细胞（仅二抗/下图紫色部分），但iPSelector可以识别（下图橙色部分）。
■ Functional Assay（对人iPS细胞的浓度依赖性细胞毒性）
iPSelector显示出较强的人iPS/ES细胞特异性细胞毒性（补体非依赖性）（左图）。通过二抗处理大幅增加了细胞毒性（右图）。
已经确认了不仅对单细胞悬液中的细胞的毒性，而且对形成细胞集落的细胞也有毒性。细胞死亡的机制是通过坏死而非凋亡。
左图：iPSelector与人iPS细胞株（Tic细胞）在4°C下孵育45 min后的活细胞数。iPSelector与同型的α-MBP抗体
左图：（对照）不同，拥有抗体浓度依赖性的细胞伤害作用。
右图：iPSelector浓度为1 μg/100 μL时添加二抗能进一步增强细胞毒性。添加0.1μg/100μL二抗时，90%以上的细
左图：胞被杀死。
■ iPSelector的人ES/iPS细胞伤害活性
除了Tic细胞株（人iPS细胞）以外，iPSelector对世界上常用的人iPS细胞株201B7和人ES细胞株H9以及KhES-3也显示相同的细胞伤害活性。将细胞和抗体在4℃下孵育45 min，活细胞数量随iPSelector浓度的增加而减少。
◆抗体信息
● 免疫原：人iPS细胞（Tic）
● 小鼠单克隆抗体（克隆号：R-17F）
● 亚型：IgG1
● 验证交叉性：人
● 表位：存在于人iPS/ES细胞膜表面的糖脂质的糖链部分lacto-N-fucopentaoseⅠ
● (LNFPⅠ: Fuc 1-2Gal 1-3GlcNAc 1-3Gal 1-4Glc)
● 应用：免疫细胞染色、蛋白印迹、流式细胞术、去除未分化人iPS/ES细胞
● 产品规格：Protein A纯化（（1mg/mL，添加50％甘油，未添加防腐剂）
◆参考文献
1. Kawabe, K., et al., Glycobiology, 23, 322, (2013).
2. Matsumoto, S., et al., J. Biol. Chem., 290, 20071, (2015).
3. Nakao, H., et al., Glycoconj. J., DOI 10.1007/s10719-0169-9710-2
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| FDV-0014A | iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) | 25 μL | ||
| FDV-0014B | iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) | 100 μL |
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未分化标记抗体 用于人iPS细胞检出
未分化标记抗体
用于人iPS细胞检出
- 产品特性
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用于人iPS细胞检出
未分化标记抗体
Nanog、Oct3/4、Sox2是与促进自我复制能力和维持未分化状态相关的转录因子。由于发现在人ES/iPS细胞中高水平表达，Nanog、Oct3/4、Sox2可作为人ES/iPS细胞的未分化标记被广泛使用。
◆抗Nanog，兔
● 抗原：小鼠Nanog
● 形式：磷酸盐缓冲液，50w/v%甘油
● 提取：从兔血清中亲和提取
● 稀释倍数：Western Blot 1：500
免疫组化 1：200
※在使用时请选择适合实验的浓度
数据
人iPS细胞201B7株（稀释倍数×200）
◆抗Oct3/4，兔
● 抗原：小鼠Oct3/4（1-134 aa.）
● 形式：磷酸盐缓冲液，50w/v%甘油
● 提取：从兔血清中亲和提取
● 稀释倍数：Western Blot 1：1,000
免疫组化 1：500
※在使用时请选择适合实验的浓度
数据
人iPS 细胞201B7株（稀释倍数×500）
◆抗Sox2，兔
● 抗原：小鼠Sox2
● 形式：磷酸盐缓冲液，50w/v%甘油
● 提取：从兔血清中亲和提取
● 稀释倍数：Western Blot 1：1,000
免疫组化 1：200~500
※在使用时请选择适合实验的浓度
数据
人iPS 细胞201B7株（稀释倍数×200）
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
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018-27521 |
Anti Nanog, Rabbit |
免疫化学用 |
100 μL |
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015-27531 |
Anti Oct3/4, Rabbit |
免疫化学用 |
100 μL |
|
012-27541 |
Anti Sox2, Rabbit |
免疫化学用 |
100 μL |
◆相关产品
荧光标记rBC2LCN
rBC2LCN对人ES/iPS细胞表面的足糖萼上的粘蛋白样O 型糖链H-type3（Fucα 1-2Galβ 1-3GalNAc）具有高亲和性，因此可用作人ES/iPS细胞的未分化标记。用荧光素标记后，只需添加到培养液中，就能对未分化人ES/iPS活细胞进行染色。
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
029-18061 |
BC2LCN(AiLecS1) Lectin, recombinant, Solution |
糖链研究用 |
1 mg |
|
025-18063 |
1 mg×5 |
||
|
180-02991 |
rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC) |
细胞染色用 |
100 μL |
|
186-02993 |
100 μL×5 |
||
|
186-03211 |
rBC2LCN-547 (AiLecS1-547) |
细胞染色用 |
100 μL |
|
182-03213 |
100 μL×5 |
||
|
185-03161 |
rBC2LCN-635 (AiLecS1-635) |
细胞染色用 |
100 μL |
|
181-03163 |
100 μL×5 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
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抗硫酸角质素单克隆抗体（R-10G） 人iPS/ES细胞标记抗体
抗硫酸角质素单克隆抗体（R-10G）
人iPS/ES细胞标记抗体
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
抗硫酸角质素单克隆抗体（R-10G）
人iPS/ES细胞标记抗体
◆特点
● 高选择性识别人iPS/ ES细胞，几乎不识别EC细胞
● 使用简便的IgG1型抗体
◆案例
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〈检测条件〉 一抗 : A. TRA-1-81抗体（阳性对照） B. 抗硫酸角质素，单克隆抗体（R-10G）
二抗 : FITC标记二抗 细胞：人iPS细胞 201B7株 On-Feeder培养
蓝 : DAPI 绿 : FITC（抗体） |
参考文献
Kawabe, K. et al., Glycobiology, 23(3), 322 (2013).
欲了解更多相关产品请点击文字：A-83-01, MF
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 011-25811 | Anti Keratan Sulfate，Monoclonal Antibody（R-10G） | 200 μL | ||
| 017-25813 | Anti Keratan Sulfate，Monoclonal Antibody（R-10G） | 1 mL |
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StemSure™ on-feeder hPSC培养基 人ES/iPS细胞培养用液体培养基
StemSure™ on-feeder hPSC培养基
人ES/iPS细胞培养用液体培养基
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
人ES/iPS细胞培养用液体培养基
StemSure® on-feeder hPSC培养基
本产品是用于在饲养层细胞上培养人ES/iPS细胞的培养基。
由于已经预先混合了基础培养基，血清替代品，氨基酸溶液，还原剂等，可以节省制备培养基的时间。由于不含bFGF，请在使用前加入bFGF。
◆特点
● 优秀的未分化维持性
● 预混型，仅需添加bFGF即可使用。
◆实验项目
● 无菌试验
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体检测
◆数据
■ 细胞形态
■ 碱性磷酸酶染色
使用本产品和其他公司同等产品培养人iPS细胞201B7株，显示了传代3次后碱性磷酸酶的染色结果。可观察到使用本产品的每个培养皿中的分化集落数量很少，确认其具有良好的未分化维持性能。
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
195-18275 |
StemSure® on-feeder hPSC Medium |
细胞培养用 |
500 mL |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
064-04541 |
Fibroblast Growth Factor(basic), Human, recombinant [bFGF/FGFb/FGF2] |
细胞生物学用 |
50 μg |
|
060-04543 |
100 μg |
||
|
064-05381 |
Fibroblast Growth Factor(basic),Human, recombinant, Animal-derived-free [bFGF/FGFb/FGF2] |
细胞生物学用 |
50 μg |
|
068-05384 |
100 μg |
||
|
030-24021 |
CultureSure™ Y-27632 endotoxin, mycoplasma testedCultureSure™ Y-27632内毒素，支原体测试完成 |
细胞培养用 |
1 mg |
|
036-24023 |
5 mg |
||
|
034-24024 |
25 mg |
||
|
253-00591 |
5mmol/L Y-27632 Solution |
细胞培养用 |
300 μL |
|
039-24591 |
CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-freeCultureSure™ 10mmol/L Y-27632溶液，无动物源 |
细胞培养用 |
300 μL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
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StemSure® hPSC培养基△ 人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
StemSure® hPSC培养基△
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
StemSure® hPSC培养基△
本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞（人ES细胞和人iPS细胞）的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分，以及BSA和HSA等白蛋白，所以无批间差异，可实现稳定培养。但本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
◆ 特点
● 可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基
● 每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测
● 不使用动物来源成分
● 非药用毒物及剧毒物，易于处理和储存。
● 不含白蛋白的低蛋白培养基
● 可与Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用
● 可与Accutase，TrypLE Select等解离液联用
● 传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代
◆测试项目
● 细胞增殖测试（使用人iPS细胞201B7株）
● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7株）
● 无菌测试
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体测试
◆使用注意事项
本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
本产品需冷冻（-20℃）储存。溶解后不可再次冷冻，建议在2~10℃条件下进行储存，并在1周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
细胞形态
在StemSure® hPSC培养基Δ中培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同，也没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。
细胞群倍加数
移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，StemSure® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。
<培养基组成>
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF
<细胞接种数>
1×105 cells/well （使用6孔板）
未分化性能维持的确认
使用StemSure® hPSC培养基进行5次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。
※BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞
◆人ES细胞WA01株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
细胞形态
使用A公司培养基进行培养时，在2次传代以后开始出现趋向分化形态的细胞。但使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人ES细胞没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。
细胞群倍加数
移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，与A公司培养基相比，细胞的增殖能力没有差异。
<培养基组成>
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF
<细胞接种数>
1×105 cells/well （使用6孔板）
未分化维持的确认
使用StemSure® hPSC培养基Δ进行6次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼 泰子 老师、伊藤 弓弦 老师＞
◆染色体核型分析
核型分析使用StemSure® hPSC培养基Δ进行27次传代培养的人iPS细胞，确认是否存在染色体异常。
＜数据提供 独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师＞
◆人iPS细胞201B7的三胚层分化
使用StemSure®系列的培养基驯化培养了使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞201B7株。胚状体形成后，通过检测βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP的表达确认三胚层分化。
<培养基组成>
StemSure® D-MEM + StemSure® Serum
Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine +
0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1
x Non-essential Amino Acids Solution
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
197-17571 |
StemSure(R) hPSC Medium Δ |
100 mL |
|
193-17573 |
100 mL × 4 |
碱性成纤维细胞生长因子，Y-27632
|
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
060-05383 |
Fibroblast growth Factor (basic) (FGF-basic/bFGF/FGF2), Human, recombinant, Animal-derived-free(154aa) 成纤维细胞生长因子（碱性），人，重组，无动物衍生物 |
1 mg |
|
064-05381 |
50 μg |
|
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068-05384 |
100 μg |
|
|
030-24021 |
CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂） |
1 mg |
|
036-24023 |
5 mg |
|
|
034-24024 |
25 mg |
|
|
030-24026 |
100 mg |
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259-00613 |
Y-27632, MF |
5 mg |
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257-00614 |
25 mg |
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035-24593 |
CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure™ 10 mmol/l Y-27632溶液，无动物源 |
1 mL |
|
039-24591 |
300 μL |
StemSure® 系列
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产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
197-16275 |
StemSure(R) D-MEM(High glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate |
500 mL |
|
191-18375 |
StemSure(R) Serum Replacement (SSR) |
500 mL |
|
198-15781 |
StemSureR 10mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution (×100) |
100 mL |
|
195-15791 |
StemSure(R) 50mmol/L Monothioglycerol Solution(×100) |
100 mL |
|
190-15805 |
StemSure(R) 0.1w/v% gelatin Solution |
500 mL |
|
199-16051 |
StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution |
1000000 units |
|
195-16031 |
StemSure(R) Freezing Medium |
100 mL |
|
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灵长类ES/iPS细胞用培养基 Primate ES cell medium
灵长类ES/iPS细胞用培养基
Primate ES cell medium
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
灵长类ES/iPS细胞用培养基
Primate ES Cell Medium
ReproCELL灵长类动物胚胎干细胞培养基不含血清，可在饲养层上培养胚胎干细胞或多能性诱导干细胞。
◆特点
● 培养人ES/iPS细胞的最佳培养基。
● 已对所有批次进行了iPS细胞的培养试验、渗透压、pH值、灭菌、支原体检测等检查，请放心使用。
● 无血清。
注1）由于培养基里不含bfGF，进行人ES/iPS细胞培养时请自行添加。
※保存温度：-20℃
※含有医药用以外的剧毒物0.0008％的2-巯基乙醇
◆图例
使用201B7株人iPS细胞、灵长类ES细胞用培养基
(RCHEMD001) +5 ng/mL bFGF (RCHEOT002)
和饲养细胞(MEF) (RCHEFC003) 进行培养。
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|
|
RCHEFM001 |
Freezing medium for human ES/iPS cells (25mL) 灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞冻存液 |
25mL |
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RCHETP002 |
Dissociation solution for human ES/iPS cells (30mL) 灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞分离液 |
30mL |
|
RCHEMD007 |
ReproXF (500mL) 灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基（无异源蛋白成分） |
500mL |
|
RCHEMD006 |
ReproFF2 (500mL) 灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基（无饲养层培养） |
500mL |
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| RCHEMD001 | Primate ES cell medium 灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基 |
500mL | – | – |
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