超螺旋 pBR322 DNA

超螺旋质粒 pBR322 DNA 是通过大规模碱裂解法（Sambrook等人，1989 年）1 从 pBR322 的高拷贝衍生物（Boros等人，1984 年）2中产生的。

负超螺旋 pBR322 DNA 被进一步处理，使 DNA 更超螺旋，并且具有较窄的连接数范围，使其成为松弛反应的理想底物。

正超螺旋质粒 pBR322 DNA 是通过在最终纯化前用反向旋转酶处理松弛的 pBR322 产生的。

它以 1mg/ml 的 TE（10mM Tris-HCl (pH 7.5)，1mM EDTA）浓度在干冰上运输。储存于 4 o C

松弛的 pBR322 DNA

松弛质粒 pBR322 DNA 是通过大规模碱解法（Sambrook 等人，1989） 1 从 pBR322 的高拷贝衍生物（Boros 等人，1984）2 产生的，然后使用拓扑异构酶松弛得到的超螺旋质粒I. 进一步纯化和优化拓扑异构酶测定

它以 1mg/ml 的 TE（10mM Tris-HCl (pH 7.5)，1mM EDTA）浓度在干冰上运输。储存于 4 o C

将 0.5 µg 松弛的 pBR322 与 1 U DNA 促旋酶在 30 µl 的反应体积中在 37 o C 的孵育缓冲液中孵育 30 分钟后*转化为超螺旋形式。

线性 pBR322 DNA

线性质粒 pBR322 DNA 是通过大规模碱解法（Sambrook 等人，1989 年） 1 从 pBR322 的高拷贝衍生物（Boros 等人，1984 年）2产生的。

通过与 EcoRI 孵育使其线性化，并在 TE（10 mM Tris-HCl (pH 7.5)、1 mM EDTA）中进一步浓缩和纯化至终浓度为 1 mg/ml。储存于 4 o C

它是用干冰运输的。