BioDynamics DS611说明书


上海金畔为BioDynamics特约经销商,BioDynamics实验室公司成立于1999年,开发用于生物研究的试剂和试剂盒。

Long ssDNA Preparation Kit (LsODN Preparation Kit) PAT.P 

Long ssDNA制备试剂盒(LsODN制备试剂盒)为生成长的单链DNA(1,500碱基或3,000碱基)提供了一种简单易行的方法。通过该方法制备的长ssDNA具有确定的序列和长度,因为它不包括由PCR引起的内部突变和末端缺失,核酸外切酶副反应,不是高保真逆转录酶反应或不是高保真合成寡核苷酸。
该方法的步骤与获得dsDNA片段的方法几乎相同。将目的DNA克隆到质粒中。用一对两个切口核酸内切酶或切口内切核酸酶和限制酶的组合消化所得的含有DNA的质粒。通过与变性凝胶 – 上样缓冲液混合使带切口的质粒变性,然后进行琼脂糖凝胶电泳。切除对应于长ssDNA的条带并用市售试剂盒提取。

 

 

可以制备长ssDNA(在1,500碱基内或在3,000碱基内)。 

 

长ssDNA定义了序列和长度。

 

原理简单,程序简单。

 

高产量和高品质。 

 

 

质粒图

原理

1.使用一对两个切口核酸内切酶位点或切口核酸内切酶位点和限制酶位点
2的组合将感兴趣的DNA克隆到质粒中。用一对切口消化得到的带有DNA的质粒。核酸内切酶或核酸内切酶切口的组合和限制性内切酶
3.变性凝胶上样缓冲液(DS611),然后进行琼脂糖凝胶电泳带切口的质粒变性使用
4对应于一个长的ssDNA的频带被切出,并萃取。 

通过该试剂盒制备的长ssDNA

在Nt.Bsp QI和Nb之间克隆目标的1.5kb DNA片段。pLSODN-1的Bsr DI位点。类似地,在Nt.Bsp QI和Nb之间克隆目标3.0kb的DNA片段。pLSODN-3的Bsr DI位点。
用Nt.Bsp QI和Nb消化所得质粒。Bsr DI。
将双切口质粒与变性凝胶 – 上样缓冲液(DS611)混合并加热,然后加载到常规的非变性琼脂糖凝胶电泳中。
切除对应于长ssDNA的条带并提取。 
 
泳道:1含有1,500 bp DNA片段的双切口pLSODN-1 
泳道:2纯化的长ssDNA(1,500碱基)
泳道:3含有3,000 bp DNA片段的双切口pLSODN-3 
泳道:2纯化的长ssDNA(3,000碱基) 

使用该产品的
原稿ssODN介导的敲入CRISPR-Cas用于受精卵中的大基因组区域。Yoshimi K,Kunihiro Y,Kaneko T,Nagahora H,Voigt B,Mashimo T.(2016)Nature Communications。20; 7:10431。

 

产品名称

尺寸

DS610

用于1.5 Kb的长ssDNA制备试剂盒
(LsODN制备试剂盒)

pLSODN-1
10微克(0.5微克/微升)
pLSODN-2D
10微克(0.5微克/微升)
变性凝胶上样缓冲液
1毫升(100个负载)
DynaMarker®Prestain标记为RNA高
90微升(18个负载)

DS620

用于3.0 Kb的长ssDNA制备试剂盒
(LsODN制备试剂盒)

pLSODN-310μg
(0.5μg/μl)
pLSODN-4D10μg
(0.5μg/μl)
变性凝胶加载缓冲液
1 ml(100次加载)
DynaMarker®PrestainMarker for RNA High90μl
(18次加载)

DS611

变性凝胶加载缓冲液

变性凝胶加载缓冲液
1 ml x 5(500次加载)

要访问这些套件的完整序列,您需要密码!
密码显示在数据表或框中。 
如果有问题,请随时与我们联系。 

 

 

 

DNA Size Marker

 

DM112

DynaMarker® DNA Low D

 

DM122

DynaMarker® DNA High D

 

DM132

DynaMarker® for Plasmid D

 

DM100

DynaMarker® DNA Small

 

DM310

λHind III Marker

 

 

 

DNA Loading Dye

 

DM210

6×BPB Loading Dye

 

New Type Colored Size Molecular Weight Marker

 

DM253

DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus

 

DM260

DynaMarker® Prestain Marker for RNA High

 

DM270

DynaMarker® DIG Labeled Blue Color Marker for Small RNA

 

 

 

RNA Size Marker

 

DM152

DynaMarker® RNA Low II

 

DM157

DynaMarker® RNA Low II Easy Load

 

DM160

DynaMarker® RNA High

 

DM170

DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis

 

DM180

DynaMarker® dsRNA

 

DM185

DynaMarker® dsRNA Easy Load

 

DM192

DynaMarker® Small RNA II

 

DM197

DynaMarker® Small RNA II Easy Load

 

 

 

Protein Size Marker

 

DM610

DynaMarker® Protein Eco

 

DM625

DynaMarker® Protein BlueRed

 

DM637

DynaMarker® Protein MultiColor III

 

DM660

DynaMarker® Protein MultiColor Stable

 

DM670

DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range

DynaZyme

 

DE110

Alkaline Phosphatase

 

 

from psychrophilic bacterium

DynaExpress

 

DS610

Long ssDNA Preparation Kit

DS620

 

DP100

ProteinChecker

 

DS500

QuickBlue Staining Solution

Other reagents for molecular biology

 

DR110

DEPC-treated Water, 1 ml Χ 5

 

DR115

DEPC-treated Water, 50 ml Χ 2

 

DR117

DEPC-treated Water, 500 ml

 

DR120

RNase-free Water, non DEPC, 1 ml Χ 5

 

DR125

RNase-free Water, non DEPC, 50 ml Χ 2

 

DR127

RNase-free Water, non DEPC, 500 ml

 

F012

DNA, Salmon Sperm, Sonicated

 

F008

Anti-6 × Histidine Antibody

 

上海金畔生物科技有限公司是专业从事生物技术产品销售的高科技企业,是国内生物试剂、仪器、消耗品领域的企业之一。金畔公司自成立以来,连续10年高速成长。公司的发展目标是建成专业从事生物技术产品销售、生产与开发的公司。 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

 

 

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Long ssDNA Preparation Kit for 10kb 可制备长达10 kb的单链DNA

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb
可制备长达10 kb的单链DNA

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

可制备长达 10 kb 的单链 DNALong ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb

◆挑战单链DNA的长度极限!


可制备 3~10 kb 的长单链 DNA。由于不进行 PCR,核酸外切酶反应或逆转录等,不会产生内部或末端的变异和缺失,可以获得含有正确序列的 Long ssDNA。

※ 本产品仅用于研究,研究以外不可使用。

 


◆特点


● 可制备含有正确的目的序列的 DNA

● 非长单链 DNA 杂质少

● 以切口酶(Nickase)酶切处理的质粒(Nicked Plasmid)进行琼脂糖电泳,分离目的单链 DNA 部分

● 试剂盒包含单链 DNA 专用胶回收试剂盒(Long ssDNA Gel Extraction Kit)

● 长链单链 DNA 可适用于各种用途

● ※ 可用作基因编辑的供体(Donor)

 


◆操作方法

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA

◆试剂盒内容


● 克隆载体骨架(16 次量)

● Denaturing Gel-loading Buffer(1 mL)

● ssDNA 电泳用标准 DNA(200 μL)

● 单链 DNA 胶回收试剂盒(Long ssDNA Gel Extraction Kit)

 


◆产品列表

产品编号

产品名称

包装

DS635

Long ssDNA Preparation Kit for 10 kb, Academic

1 kit

DS635

Long ssDNA Preparation Kit for 10 kb, Commercial Entities

1 kit



◆试剂盒单品


■ 长链单链 DNA 胶回收试剂盒


Long ssDNA Gel Extraction Kit

含单链 DNA 专用纯化柱的胶回收试剂盒。

 


■ Denaturing Gel-Loading Buffer


含长链 ssDNA 的样品进行琼脂糖凝胶电泳专用上样缓冲液。

 

产品编号

产品名称

包装

DS612

 Denaturing Gel-Loading Buffer
变性凝胶上样缓冲液 

2×1 mL

DS611

5×1 mL



■ λ/HindⅢDNA


Long ssDNA Preparation Kit for 10 kb(产品编号:DS635)用的 ssDNA 电泳 marker。

 

产品编号

产品名称

包装

DS670

λ/HindIII DNA for Long ssDNA Preparation Kit, 30 load

600 μL



◆相关产品


~1.5 kb 用/3.0 kb 用的单链制备试剂盒


Long ssDNA Preparation Kit for 1.5 kb & 3.0 kb

根据专利申请中的新技术 Nicking 酶法,制备高纯度且拥有正确序列的长单链 DNA(ssDNA, 1,500 base 或 3,000 base)

相关资料


Long ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA


Long ssDNA Preparation Kit for 10kb说明书

英文宣传页

相关产品

 

生产商

产品编号

商品名

规格

BDL

DM260

DynaMarker, Prestain Marker for   RNA High

180 μL

BDL

DM122

DynaMarker, DNA High D

1 set

 


◆Funa凝胶枪和切片凝胶专用吸管

  通过简单操作能将琼脂糖凝胶电泳后的 DNA 和蛋白质带部分回收的枪头以及专用短移液器。


详情请看下图:

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA

Long ssDNA Preparation Kit for 10kb                              可制备长达10 kb的单链DNA

长单链 DNA(ssDNA)制备试剂盒的使用文献


  ssODN-mediated knock-in with CRISPR-Cas for large genomic regions in zygotes
  Yoshimi K, Kunihiro Y, Kaneko T, Nagahora H, Voigt B, Mashimo T. Nature Communicatons.Jan;20;7:10431 (2016).

  使用切口酶法(本产品)制备的长链 ssDNA(包含了 2Apeptide 序列,GFP 全域序列,5'端300个碱基同源臂,3'端60个碱基同源臂,全长 1,194 base 的互补单链 DNA)以及附加了 poly(A)的 Cas9-poly(A)RNA,向导RNA:向大鼠受精卵显微注射 Thy1-TGA,在大鼠 rThy1 基因C末端处高效率地将绿色荧光蛋白基因(GFP基因)全域成功敲入。本论文也是首次表明,使用长链 ssDNA 的 lsODN 法(对应 ssODN 的 lsODN)能够提高外源基因全长的敲除效率。