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ULTRA Scientific 代理

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ULTRA Scientific 代理

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上海金畔生物科技有限公司 ULTRA Scientific专业代理，具体产品信息欢迎电询：021-50837765

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世界*实验材料供应商 ULTRA Scientific正式上海金畔为其中国代理， ULTRA Scientific在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为优质的产品和服务,上海金畔一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， ULTRA Scientific就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Founded in 1976, ULTRA Scientific, Inc. is a global leader in analytical chemical solution manufacturing, offering Certified Reference Materials, QC standards, reagents, and other laboratory solutions to meet the needs of laboratory professionals worldwide. 

Our extensive catalog listing of chemical standards is complemented by a flexibility to manufacture custom solutions to exacting specifications. ULTRA Scientific sells products and services direct to end-user laboratories, through international and regional distribution, and under OEM partnerships with multinational instrument manufacturers. 

In 2012, ULTRA Scientific acquired Omnion Scientific Instruments and expanded its footprint in Food & Beverage and Petroleum Testing, as a manufacturer of analytical instrumentation and reagents for in-line process controls and nutritional labeling. 

Rely on ULTRA Scientific’s 35+ years of technical experience in measurement science, working to provide innovative, quality products in a timely, cost-effective and efficient manner

专注领域

Certified Reference Materials, Reference Materials (RM), Calibration Standards, IQ/OQ/PQ, Phase, Linearity Standards, Buffers and Reagents, Titrants & Indicators, Diluents and Wash Solutions

 

公司http://www.ultrasci.com

 

 

上海金畔生物科技有限公司

利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

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利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

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利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量

检测氨基酸饮料的氨基酸

和光纯药工业株式会社 试剂化学实验室 須藤　勇紀

◆前言


　　自从天冬酰胺在1806年从芦笋汁中分离成功以来，人们开始发现氨基酸，并将其大致分为四类，即作为营养物质的利用，作为味道成分的利用，生理作用的利用，反应性的利用，这些功能在我们生活中是不可缺少的 1）。另外，在动物体内无法合成的氨基酸既是动物的必需氨基酸，也是很重要的食物营养素。

　　在日本实施的1991年特定保健食品体系、2002年保健功能食品体系、2015年功能性食品体系过程中，也是期待着将氨基酸作为保健品用于国民自我治疗药物的实践中 2,3）。功能性标示食品制度因其呈报制度更便于新企业参与。2017年3月特定保健用食品的数量为 1,127 件，功能性标示食品从以往的 815 件正在急剧增加中。从而可预计保健食品市场将迅速扩大。氨基酸作为营养素的功能已被广泛认可，以饮料、健康饮料、果冻等多种形态的氨基酸的食品流通于市场中 1），未来也将继续推出更多含有氨基酸的新型食品。



◆3-氨基吡啶-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（APDS）衍生化


　　高效液相色谱法（HPLC）中的氨基酸分析衍生化技术是很久以前便存在的，因此市面上也存在许多种类的衍生剂，其中包括茚三酮和邻苯二甲醛。本次介绍的 APDS 氨基酸衍生化技术是一种具有高疏水性，且因其高电离效率更有利于反相 LC/MS（/MS）的方法。

　　该方法不仅用于味之素株式会社的“Amino index® 癌症风险筛选”（AICS）7）。在食品分析中也用于氨基酸分析专用装备（UF-Amino Station）的分析案例 8）。

　　Wakopak® Ultra APDSTAG® 是一种专用分析柱，可利用 LC / MS / MS 仪器对 APDS-氨基酸衍生物进行分离分析。本次我们介绍的是使用该柱分析市售氨基酸饮料中的氨基酸种类。

利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

◆实验方法和结果分析


　　样品前处理和衍生化的流程如图1所示，LC / MS / MS条件如表１所示。 定量采用内标法进行。在这次实验的饮料中，据材料记载氨基酸种类含有甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、缬氨酸（Val）、亮氨酸（Leu）、异亮氨酸（Ile）和精氨酸（Arg）这六种种类，但市售饮料中都不含表１的 No.13~20 的氨基酸类。图2显示的是市售饮料中的６种氨基酸的 MRM 色谱分析图。接下来，将氨基酸标准品加入到获得该色谱的样品中，并进行回收实验。图３显示的是添加标准品后饮料的 MRM 色谱图，而图４则是加标回收实验的结果显示图。回收率高达 99-103％。

　　根据这次研究的结果显示，使用 Wakopak® Ultra APDS TAG® 进行 APDS 衍生化的氨基酸定量检测是有效的。虽然这次推出的结果仅限于饮料，但对于分析其他食品和培养液等样品也是有用的，欢迎采购此产品用于定量分析氨基酸。


表１．LC/MS/MS 条件

设备

Prominence LC-20A XR（岛津公司）

柱

Wakopak® Ultra APDS TAG® φ2.1×100 mm（W）

防护过滤器

SunShell RP 防护过滤器（Cromanic   Technologies）

流动相 A

APDS TAG® 洗脱液

流动相 B

60％乙腈

梯度条件

0 min.（A：B=94：6）→0.05 min.（92：8）

→1.70 min.（92：8）   →1.71 min.（88：12）→4.95 min.（70：30）→5.95  min.（40：60）→5.96 min.（5：95）→6.70 min.（5：95）

→6.71 min.（94：6）→12 min.（94：6）

流量

0.3 mL/min.

柱温

40 ℃

注射量

1 μL

 

设备

LCMS-8030 Plus（岛津公司）

电离

ESI positive

测量模式

MRM

DL 温度

250 ℃

雾化器气体流量

1.5 L/min.

加热块温度

250 ℃

干燥气体流量

10 L/min.

 

No.

组件名称（简称）

分子量

监测因子（m/z）

前体

制品

1

甘氨酸（Gly）

75.1

196.1

121.0

2

甘氨酸-13C2，15N（Gly-IS）

78.1

199.1

121.1

3

丙氨酸（Ala）

89.1

210.1

121.0

4

丙氨酸-13C3（Ala-IS）

92.1

213.1

121.1

5

缬氨酸（Val）

117.2

238.1

121.0

6

缬氨酸-13C5,   15N（Val-IS）

123.1

244.1

121.1

7

亮氨酸（Leu）

131.2

252.1

121.0

8

异亮氨酸（Ile）

131.2

252.1

121.0

9

亮氨酸-5,5,5-d3（Leu-IS）

134.2

255.1

121.1

10

异亮氨酸-13C6,15N（Ile-IS）

138.1

259.1

121.1

11

精氨酸（精氨酸）

174.2

295.1

175.1

12

精氨酸-15N4（Arg-IS）

178.2

299.1

179.1

13

肌氨酸（Sar）

89.1

210.0

121.0

14

羟脯氨酸（Hypro）

131.1

252.1

121.0

15

天冬酰胺（Asn）

132.1

253.1

121.0

16

天冬氨酸（Asp）

133.1

254.1

121.0

17

谷氨酰胺（Gln）

146.1

267.1

121.0

18

谷氨酸（Glu）

147.1

268.1

121.0

19

α-氨基己二酸（α-AAA）

161.2

282.1

121.0

20

瓜氨酸（Cit）

175.2

296.3

121.0

 

利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

图2. 市售饮料中６种氨基酸成分的 MRM 色谱图

 

利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

图3. 添加标准品后饮料的 MRM 色谱图


利用 Wakopak® Ultra APDSTAG® 定量 检测氨基酸饮料的氨基酸

图4. 加标回收实验的结果显示图


<致谢>感谢味之素股份有限公司的每一位同仁对本产品的合作。

 Wako Pack® Ultra APDS Tag® 通用 LC / MS 可以实现高灵敏度和高速氨基酸分析。

◆产品列表


产品编号

产品名称

包装

235-63973

Wakopak® Ultra APDS TAG® φ2.1mm × 100mm（ W）

1支

 


◆相关产品


产品编号

产品名称

标准/制造商

规格

014-23841

Amino Acid Analysis Reagent (for LC/MS) (AminoTag(R))

氨基酸分析试剂

（用于LC/MS）

用于氨基酸自动分析

100 mg

016-28161

Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN (High Range)

氨基酸混合标准溶液, AN型（高浓度）

 用于氨基酸自动分析 1 mL×5A，5 mL

010-28164

012-28141

Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B (High Range)

氨基酸混合标准溶液, B型（高浓度）

 用于氨基酸自动分析 1 mL×5A，5 mL

016-28144

019-28151

Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H (High Range)

氨基酸混合标准溶液, H型（高浓度）

 用于氨基酸自动分析 1 mL×5A，5 mL

013-28154

293-73701

APDS TAG® Wako Amino Acids Internal   Standard Mixture Solution

用于氨基酸自动分析

1套

010-23061

APDS Tag Wako Eluent

APDS标签洗提液

用于氨基酸自动分析

1 L

019-23151

APDS Tag Wako Borate Buffer

APDS标签硼酸盐缓冲液

用于氨基酸自动分析

1 L

 


参考文献


[1]　味の素株式会社 編：「アミノ酸ハンドブック」 （工業調査会）（2003）.

[2]　大澤 俊彦：化学と生物，44 （6），406 （2006）.

[3]　和田 他：分析化学，65 （6），301 （2016）.

[4]　湯田 直樹：健康・栄養食品研究，16 （1），1 （2017）.

[5]　特許第 4453363 号．

[6]　宮野 博：和光純薬時報，79 （1），2 （2011）.

[7]　今泉 明：化学と生物，53 （3），192 （2015）.

[8]　渡邊 他：島津評論，69 （1・2），47 （2012）.