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VA-044 2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride

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VA-044
2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride

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VA-044 VA-044 2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride

  2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochlorideVA-044 2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride

  中文名称：偶氮二异丁咪唑啉盐酸盐
  CAS NO.：27776-21-2
  英文缩写：AIPC / AIBI


◆特征 

 ●　非腈、低温型水溶性偶氮重合开始剂 
 ● 　可溶于水、甲醇 
 ●　10小时半减期温度44℃（水中）



◆化学名 

   2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride


VA-044 2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride

 

 CAS NO. 27776-21-2

  分子量 ＝ 323.27



◆物理性质

外观：白色~淡黄色 ，结晶或者结晶型粉末

融点：188~193℃（分解）

10小时半减期温度：44℃（水中）

活化性能量：108.2K J/mol    K

频率因子（ln A）：30.19


溶解性：

水：易溶 
甲醇：有点难溶 
乙醇：非常难溶 
丙酮、甲苯


SADT：140℃

毒性（LG50）：3,200 mg/kg（经口大鼠[雄]） 
                          2,800 mg/kg（经口大鼠[雌]）

 


◆包装、保存条件 

   20 kg（4×5 kg）纸箱 
   500 g 纸盒 

   30℃以下保存



◆相关法规·安全性

剧毒法

不符合

消防法

不符合

化审法

5-5870、1-215

安卫法

已存在

TSCA

Listed

EINECS

248-655-3


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
017-19362 2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride
偶氮二异丁咪唑啉盐酸盐		 25 g
011-19365 2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride
偶氮二异丁咪唑啉盐酸盐		 500 g

haemtech活化蛋白C说明书

发表于由

 

haemtech活化蛋白C说明书

Activated Protein C

活化蛋白C

 

活化蛋白C（APC）使因子Va失活
代表了APC对因子Va的蛋白水解失活，其中：PS =蛋白S，PCPS =磷脂囊泡（或细胞表面），Ca ++ =钙离子。因子Va失活形成因子Vai的原因是APC在三个特定位点对因子Va重链（94K）进行了蛋白水解（实心箭头）（1,2）。这些切割位点在因子Va重链中的位置如下：(人：R306，R506和R679）和（牛：R306，R505和R662）。辅因子分子的*灭活需要在精氨酸306位裂解。活化蛋白C在精氨酸306上的切割仅在存在膜的情况下发生，并且需要事先在精氨酸505上切割重链。APC对因子Va轻链进行的蛋白水解仅在牛分子中发生，并且对于灭活不是必需的（虚线箭头）。

  •  HCAPC-0080 人类激活的蛋白C
  • 尺寸 50微克
    公式 50％（vol / vol）甘油/ H 2 O
    存储 -20°摄氏度
    纯度 通过SDS-PAGE，> 95％
    活性测定 显色测定
    保质期（正确存放） 12个月
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  • HCAPC-DEGR 人类激活蛋白C-DEGR（激活位点被封锁）

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    尺寸 50微克
    公式 20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4
    存储 -80°摄氏度
    纯度 通过SDS-PAGE，> 95％
    活性测定 显色测定
    保质期（正确存放） 12个月
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  • BCAPC-1080 牛活化蛋白C

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    尺寸 50微克
    公式 50％（vol / vol）甘油/ H 2 O
    存储 -20°摄氏度
    纯度 通过SDS-PAGE，> 95％
    活性测定 显色测定
    保质期（正确存放） 12个月
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  • BCAPC-DEGR 牛激活蛋白C-DEGR（阻止活性位点） 
  • 尺寸 50微克
    公式 20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4
    存储 -80°摄氏度
    纯度 通过SDS-PAGE，> 95％
    活性测定 显色测定
    保质期（正确存放） 12个月

 

 

 

 

 

 

活化蛋白C（APC）是一种抗凝血丝氨酸蛋白酶，来源于两条链，依赖于维生素K的酶原，蛋白C（3-7）。α-凝血酶和血栓调节蛋白之间的复合物催化蛋白C重链中Arg-12（牛中的Arg-14）的单裂，从而产生活化的C蛋白。几种非生理相关的蛋白酶，例如RVV-X激活剂，胰蛋白酶和PROTAC也能够激活C蛋白。

APC用作抗凝血剂，可催化辅因子Va和VIIIa因子的蛋白水解失活，从而导致凝血酶原酶和Xase因子复合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活都是Ca2 +和磷脂依赖性的。维生素K依赖的辅因子蛋白S通过与APC形成1：1的复合物（Kd = 6×10-9M）适度提高了失活率（8）。

有几个因素减弱了APC的抗凝活性。Xa因子通过竞争因子Va上相似的结合位点来保护因子Va免于APC的蛋白水解作用。凝血酶也已被提出通过蛋白S的蛋白水解失活作为APC的调节剂。此外，APC还受循环肝素依赖性蛋白的调节C抑制剂（PAI-3），肝素非依赖性循环蛋白C抑制剂，血小板衍生的蛋白C抑制剂和PAI-1。据报道，在APC和两种PAI类型之间形成的复合物可说明在输注APC或体内产生APC时观察到的纤维蛋白溶解增加。

除了我们的标准APC制剂外，还可以使用含有Dansyl-EGR-氯甲基甲酮的活性位点封闭形式。

活化的蛋白C是由纯化的蛋白C通过凝血酶激活，然后进行离子交换色谱法制得的（4）。APC以50％（体积/体积）甘油/水的形式提供，应储存在-20oC下。通过SDS-PAGE分析确定纯度，并使用生色底物测定法测量活性。还按照APC耐药性分析的要求测试了所有生产批次的APC延长正常人血浆aPTT的能力（10,11）。该测试的结果以aPTT（+/- APC）比（10nM APC）的形式提供给每个批次。

 

 

 

VA-044（聚合物引发剂）

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VA-044（聚合物引发剂）

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VA-044VA-044（聚合物引发剂）

用于脂质提取的聚合物引发剂

　　一个世纪以来，生物学家们一直梦想着能够透过器官甚至整个机体，亲眼看到细胞连接和精细结构，现在随着组织透明化技术的完善，这一梦想终于成为了现实。

◆原理


VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂，普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在 CLARITY 方法中，VA-044 作为引发剂，催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和 PFA 形成水凝胶。

2013 年3 月，斯坦福大学的 Karl Deisseroth 博士领导的团队在自然杂志（Nature）上发表了 Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的论文，文中介绍了制备组织的方法 CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中（Hydrogel Monomer Solution）中，经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构，使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上，因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验，免疫染色，原位杂交等实验。

　　CLARITY 可用于荧光蛋白质和抗体的免疫染色，可作为解析脑神经回路的有效工具。VA-044 是论文实验步骤中透明化工程的使用试剂。


◆特点• 优势


●   操作简单，固定蛋白后只需进行电泳；

●    可保持组织、器官和全身结构的完整性；

●    可进行原位杂交和免疫组化实验，可进行多轮染色和脱色步骤；


VA-044（聚合物引发剂）

◆案例•应用


Clarity 介绍

VA-044（聚合物引发剂）

PARS 介绍


2014 年7 月，加州理工学院的研究团队在细胞杂志（Cell）上发表论文 Single-Cell Phenotyping within TransparentIntact Tissue through Whole-Body Clearing，将 CLARITY 技术推进到一个新的高度——全身组织透明化技术，称为 PARS（Perfusion-assisted Agent Release in Situ）。这种技术将透明剂持续泵入动物的循环系统从而进入各个组织，或者通过脑脊液管道泵入大脑，再去除脂质，使器官和生物体被高分子渗透而呈现透明，并可用荧光抗体分析和揭示具有完整连接性的细胞结构和三维细胞排列。


VA-044（聚合物引发剂）

VA-044（聚合物引发剂）

图Ａ．PARS 建立的小鼠透明化肠，并用凝集素（lectin）

亚甲基蓝（methylene blue）、DAPI 进行免疫标记后成像 

并获得三种免疫标记的叠加图（merge）

图Ｂ．PARS 建立的小鼠透明化肾脏并用抗微管蛋白抗体

和 DRAQ5 进行免疫标记后成像，并获得两种免疫

标记的叠加图   

CLARITY 处理的小鼠脑


 VA-044（聚合物引发剂）

CLARITY 处理的小鼠大脑成像


VA-044（聚合物引发剂）

CLARITY 处理的 Thy1-YFP（H Line）小鼠大脑的荧光观察
（A）从大脑皮质到海马的３-D观察图像
    （B）大脑皮层Ⅴ层的锥体细胞的树突图像
拍摄条件：双光子   使用设备：Olympus FV1000 直立显微镜，25 倍浸液物镜

 


CLARITY+抗体处理的小鼠大脑成像


VA-044（聚合物引发剂）

CLARITY 处理后，用 Iba1抗体染色 Thy1-YFP（Ｈ线）小鼠大脑的荧光观察
　　　　　（A）在大脑皮质的小胶质细胞的３-D观察图像
（B）从表面层观察皮质Ⅰ层的图像
拍摄条件：单光子   使用设备：Olympus FV1000 直立显微镜，25 倍浸液物镜

VA-044（聚合物引发剂）

请点击图片观看视频

组织透明化辅助试剂

脂质除去用电泳槽

◆相关资料

VA-044（聚合物引发剂） VA-044（聚合物引发剂） VA-044（聚合物引发剂）

VA-044(聚合物引发剂）

CLARITY电泳仪器

CLARITY_Protocol

VA-044（聚合物引发剂）

VA-044（聚合物引发剂）

文献验证可与FUJIFILM Wako透明化试剂配合使用的抗体列表

组织透明试剂化系列

◆相关产品

制造商

产品编号

产品名称

中文名称

包装

NIHON EIDO

631-26271

Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

脂质去除用电泳槽

一台



CLARITY 步骤


VA-044（聚合物引发剂）

水凝胶单体溶液组成


●　VA-044············         1 g
●　40％的丙烯酰胺······ 40 mL
●　２％双丙烯酰胺·····  10 mL
●　10×PBS···········        40 mL
●　16％多聚甲醛·····    100 mL

●　皂素···········             200 mL

●　水·············               210 mL


电泳缓冲液


●　硼酸…       123.66 g
●　SDS····       400 g
●　NaOH···    调制至 pH8.5

●　水·····         定容至10 L

●　Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction


循环泵


●　GPU-1，GPU-2（AS 版）

CLARITY 试剂列表


产品编号

产品名称

中文名称

规格

包装

017-08012

Acrylamide

丙烯酰胺

电泳用

25 g

019-08011

100 g

011-08015

500 g

138-06032

N,N'-Methylenebis(acrylamide)

N,N'-亚甲基双(丙烯酰胺)

电泳用

25 g

130-06031

100 g

163-25265

10×PBS(-)

磷酸缓冲液

细胞培养用

500 mL

160-16061

Paraformaldehyde

多聚甲醛

组织固定用

100 g

162-16065

500 g

163-25983

16w/v% Paraformaldehyde   Solution, Methanol free

16w/v% 低聚甲醛溶液

电子显微镜用

10 mL×10A

198-08853

Saponin, from Soybeans

皂素

和光一级

1 g

192-08851

5 g

029-02191

Boric Acid

硼酸

试剂特级

100 g

021-02195

500 g

023-02194

4 kg

190-13982

Sodium Dodecyl   Sulfate

十二烷基硫酸钠

分子生物学用

25 g

192-13981

100 g

194-13985

500 g

参考文献


[1]  Chung K. et al. :Nature., 497, 332（2013）.

[2]   Yang B.et al.:Cell., 158:1-14（2014）.

[3]  Yang et al., Single-Cell Phenotyping within Transparent Intact Tissue through Whole-Body Clearing, Cell(2014).<全文>

[4]  Susaki et al., Whole-Brain Imaging with Single-Cell Resolution Using Chemical Cocktails and Computational Analysis[J].Cell (2014),<全文>
[5]  Kwanghun Chung, JenelleWallace, Sung-Yon Kim,et al.Structural andmolecular interrogation of intact biological systems[J].NATURE,2013.<全文>

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
223-02112 VA-044 25 g 细胞生物学 –
225-02111 VA-044 100 g 细胞生物学 –
227-02115 VA-044 500g 细胞生物学 –
019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)		 50μg 免疫化学用 –

Bovine Factor V/Va（牛凝血酶因子V/Va）BFV/Va说明书

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 Enzyme Research ，Enzyme Research 介绍,Enzyme Research 代理,Enzyme Research 代理,Enzyme Research *代理,Enzyme Research 中国代理

Enzyme Research 是一家拥有超过25年的酶研究的实验室，生产和开发多种用于基本凝血研究的多种酶和辅因子。在过去的十年Enzyme Research Laboratories为科学家参与止血和血栓形成的研究提供了宝贵支持。Enzyme Research通过不断追求产品的zui高品质，赢得了世界各地凝血研究实验室的信任。
Enzyme Research Laboratories为生物技术公司,制药行业、医院和大学的研究实验室提供用于的纯化抗凝因子。除了其制造能力，Enzyme Research Laboratories也创新研发领域中的血液凝固技术。

Bovine Factor V/Va

 

 

BFV/Va                           Bovine Factor V/Va

 

Purified from freshly collected bovine plasma using a combination of salt precipitations and column chromatography. This protein is a mixture of Factor V/Va and intermediate activation products as judged by 4-20% gradient gels. Bovine Factor Va functions as a cofactor with the serine protease Factor Xa in the activation of prothrombin. This protein may be used as a source of V/Va in the Prothrombinase complex.

Buffer composition = 20 mM HEPES-HCl/0.15 M NaCl/pH 7.4/50% glycerol
*Extinction Coefficient （1%） = 9.6/17.4
One unit = 10 µg
Molecular Weight = 330,000; 94,000; 74,000; 71,000; 31,000 daltons
Concentration determined by BCA