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WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)

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WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker
WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)

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WESTERN-VIEW™ Western 蛋白marker(32-165 kDa)WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)

 

◆原理


      用于免疫印迹的蛋白marker，包括5种抗体结合的条带（32~165 kDa）和两种与色素体结合的条带（蓝色：29 kDa，橙色：105 kDa）。这 5种抗体结合的蛋白可以结合实验中使用的抗体，检测时会以条带形式出现，无需进行另外的实验步骤，也不需要另外的试剂。每种蛋白是E.coli表达的重组蛋白。可全程监控免疫印迹实验中蛋白的位置。

 


◆优点・特色


● 　免疫印迹实验时可检测到

●　包括两种结合色素体的条带和5种抗体结合的条带

●　 不需要煮沸或者稀释

 


◆案例・应用


1、使用前将产品放置在室温

2、用枪头或则震荡仪充分混匀液体

3、每块胶 2~5 μL/道

4、转移到膜上后，在抗体反应时候，使用的抗体也会结合到marker上


WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)

胶：SuperSep™ Ace, 10-20%, 17 wells

（产品编号：198-15041 ）

Running Buffer：SDS-PAGE Buffer, pH 8.5

（产品编号：192-16801）


蛋白marker：该产品（产品编号：236-02723 ）5 μL/道


膜：Clear Trans SP PVDF Membrane, Hydrophobic, 0.2 μm

（产品编号：033-22453 ）


抗体：抗山羊IgG，过氧化氢标记

化学发光试剂 ImmunoStar Zeta（产品编号：295-72404）

     


组成：

125 mmol/L Tris-HCl (pH 6.8), 10 mmol/L DTT, 5 mmol/L EDTA, 
17.4 w/v% 甘油, 3 w/v% SDS, 0.01 w/v% 酚红 

备注：

●　避免反复冻融

●　产品的检测灵敏度取决于抗体和使用的检测试剂

●　高灵敏度的检测系统会导致有额外的条带。请减少上样量。

●　与Native-PAGE实验不兼容

WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)

   

抗体结合条带（32~165 kDa）的标准曲线

 

◆产品列表

产品名称

规格

货号

级别

保存条件

WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32 – 165 kDa)

25 μL（5~12次）

230-02721

电泳实验

-20℃

250 μL（50~120次）

236-02723



◆其他相关产品

产品名称

包装规格

货号

级别

保存条件

SuperSep™ Ace, 10-20%, 17 well

10块

198-15041

电泳

2~10℃

SDS-PAGE Buffer, pH 8.5

5 L

192-16801

25℃以下

ClearTrans SP PVDF Membrane, Hydrophobic

0.2 μM

033-22453

免疫印迹实验

室温

ImmunoStar Zeta

200 cm2

291-72401

-80℃

2000 cm2

295-72404

1000 cm2

297-72403


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
230-02721 WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)
WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker		 25 μL – –
236-02723 WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker(32-165kDa)
WESTERN-VIEW™ Western蛋白marker		 25 μL – –

荧光western blot注意事项

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随着荧光检测的普及，许多研究人员正考虑将western blot的检测方法从化学发光转到多重荧光。这一趋势背后有多个推动力。zui重要的是，荧光检测能够实现多重western blot分析，每次能够同时检测几个目标蛋白，而不再需要剥离和重新杂交。荧光的其他好处在于动态范围更宽、信号稳定性更好。

荧光blotting的小贴士

 

• 抗体浓度应当优化，在几种不同稀释度的抗体中孵育膜。选择信噪比zui高的稀释度。

• 从化学发光转到荧光检测时，一抗浓度应当增加；通常来说是增加2-5倍。二抗浓度可能也需要优化；1:5,000稀释是个不错的起点。在使用特定抗体时，可以参照生产商的建议。

• 为了让信噪比zui高，应使用自发荧光低的膜，如 Immun-Blot® low fluorescence （LF） PVDF membrane。

• 许多封闭液都成功用于荧光检测。我们建议使用0.5-5% 酪蛋白、zui多5%的脱脂奶粉，或zui多3% BSA，溶于TTBS中。

• 缓冲液中的颗粒可能停留在膜上，并造成荧光假象。只使用高质量的试剂，并对所有缓冲液过滤灭菌。

• 使用钝的镊子从边缘操作。避免划破膜或弄皱，这会在荧光检测时造成假象。

• 使用铅笔来标记膜，因为许多墨水都会发出荧光。

• 溴酚蓝会发出荧光。确保染料与样品已分开，切掉凝胶上包含染料的部分，或省掉样品缓冲液中的溴酚蓝。

• 无需在暗处开展免疫检测；正常的室内灯光不会使荧光标记的抗体发生光漂白。不过，荧光标记抗体的储液应保存在暗处。

• 在处理膜时，使用无粉末的手套，以避免膜上出现假象或指纹。

 

多重分析的小贴士

 

• 使用来自不同宿主的一抗（如小鼠和兔）。两个亲缘关系相近物种的抗体（如大鼠和小鼠）通常会造成交叉反应，即使抗体已经过交叉吸附。

• 使用经过交叉吸附的二抗，以避免交叉反应。

• 使用光谱上不同的荧光基团偶联物，避免交叉通道荧光。

• 在同时检测多个目标之前，单独优化每个目标的检测。由于一些一抗并非很特异，在膜上会产生多条带，故多重实验之前的单目标检测将有助于确定每个抗体的条带模式。

• 大部分膜在波长较短的激发光下会显示出较高的背景。记住，在蓝色通道检测zui强的目标，在绿色通道检测中等目标，而保留红色通道来检测zui弱的目标。

 

Quansys Biosciences 产品代理

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Quansys Biosciences 产品代理

简要描述：Quansys公司的Q-View Imager细胞因子阵列分析仪，支持基于96孔板的化学发光成像和化学发光Western blot成像。应用领域是蛋白质和核酸研究，具体包括Western分析，In-Gel Western分析，蛋白质定量分析，双色磷酸化分析，考马斯亮兰胶的扫描，蛋白双向电泳，双色EMSA，双色微孔板分析，Southern Blot等。Quansys Biosciences

详细介绍

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  Quansys Biosciences公司的Q-View Imager细胞因子阵列分析仪，支持基于96孔板的化学发光成像和化学发光Western blot成像。应用领域是蛋白质和核酸研究，具体包括Western分析，In-Gel Western分析，蛋白质定量分析，双色磷酸化分析，考马斯亮兰胶的扫描，蛋白双向电泳，双色EMSA，双色微孔板分析，Northern Blot，Southern Blot等；可以满足生命科学研究、蛋白质组学、基因组学、药物开发和高通量筛选技术（HTS）各领域内的科研需求。另外，还包含软件包Q-View Software，可直接进行Q-Plex阵列和其他化学发光检测数据分析。

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上海金畔生物科技有限公司